《仪器分析教学课件》第二章 色谱基本理论.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 例 称取苯二甲酸混合物样品0.3578g，内标物癸二酸0.1029g，将样品及内标物甲酯化后进行气相色谱分析，测得间苯二甲酸二甲酯的峰面积为23.7，癸二酸二甲酯的峰面积为24.5，已知两种酯的重量校正因子分别为0.77和1.00，求间苯二甲酸的含量。 解 查出分子量癸二酸202，癸二酸二甲酯230，间苯二甲酸166，间苯二甲酸二甲酯194 例 测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱，称取内标物、黄连碱和小檗碱的对照品各0.2000g配成溶液后进行色谱分析。测得峰面积分别为3.60，3.43和4.04cm2。称取0.2400g内标物和试样0.8560g，同法测得各峰面积为4.16，3.71和4.54cm2。计算黄连碱和小檗碱的含量。 解 校正因子法 内标对比法 例 采用内标标准曲线法进行水溶液中异丙醇的分析：取6支10mL容量瓶，在其中5支容量瓶中配成质量分数不同的异丙醇标液，各加入同量的正丁醇作内标；另1支容量瓶中加入5mL水溶液和同量的正丁醇，稀释至刻度。进样1uL，色谱数据如下，计算水溶液中异丙醇的含量。 解 根据以上数据绘制A异丙醇/A正丁醇—W异丙醇％工作曲线，测得异丙醇含量为37.5％，由于稀释了一倍，所以水样中异戊醇的含量为75％ 编号 W异丙醇％ W正丁醇％ A异丙醇 A正丁醇 A异丙醇/A正丁醇 1 10 25 100 250 0.4 2 20 25 200 250 0.8 3 30 25 300 250 1.2 4 40 25 400 250 1.6 5 50 25 500 250 2.0 6 未知 25 375 250 1.5 内标标准曲线法 内加法：将待测组分的对照品加入待测样品中，测定峰面积的增量，求算组分的含量。 例 称取二甲苯试样110.0mg，加入对二甲苯对照品30.0mg，用反相色谱法测定，加入对照品前后的色谱峰面积（mm2） ：对二甲苯为40.0和104.2，间二甲苯为141.8和156.2。计算对二甲苯的百分含量。 解 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * A─涡流扩散项 dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp↓， 填充越均匀λ越小，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 A = 2λdp B/u —分子扩散项 B = 2?Dg ? ：弯曲因子。 填充柱色谱， ? 1；毛细管色谱， ? =1 (由于柱中填充物的存在，阻碍分子不能自由扩散） Dg：试样组分分子在气相中的扩散系数 (1) 存在着浓度差，产生纵向扩散，扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)，分离变差; (2) 分子扩散项与流速有关，流速↓，滞留时间↑，扩散↑; (3) 扩散系数：Dg 与(M载气)2成反比； M载气↑，B值↓。 (4) Dg 随温度升高而增加，随压力增加而下降。 C u —传质阻力项 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL即： C =（Cg + CL） k为容量因子； dp为固定相的平均颗粒直径； df为固定液液膜平均厚度。 Dg 、Dl组分分子在气相、液相中的扩散系数。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。 C u —传质阻力项 载气流速与柱效——最佳流速 载气流速与柱效——最佳流速 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，流速?，柱效?。 载气流速低时： 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，流速?,柱效? 。 速率理论的要点 (1