荧光光谱标准加人法测定苯甲酸钠的含量.docVIP

荧光光谱标准加人法测定苯甲酸钠的含量 我国国标G B2 7 6 O一19% 规定食品中苯丙酸钠含量低于0. 2g/Kg , 苯甲酸和苯甲酸钠作为防腐剂适用范围: 碳酸饮料、低盐酱菜、酱类、蜜饯、葡萄酒、果酒、软糖、酱油、食醋、果酱 不包括罐头 、果汁 味 型饮料、食品工业塑料桶装浓缩果汁。《绿色食品食品添加剂使用准则》中规定绿色食品中禁用 苯甲酸钠和苯甲酸。 当前对苯甲酸钠的测定方法主要有: 滴定法、紫外分光光度计法、液相色谱法、毛细管电泳法等,而被研究所用的是荧光光谱法, 其优点主要是测量准确、灵敏度高、选择性强。 1 实验部分 1 主要的试剂和仪器试剂: 苯甲酸钠 纯度 9 9. 5 % , 上海来泽精细化 学品研究所 , NaA c·3H2O 纯度 9 9 % , 宜兴市第二化学试剂厂 , 浓盐酸 纯度36 % 一38 % , 莱阳市康德化工有限公司 , 饮料 市售, 密度1.00 9g/m L , 试验用水为二次蒸馏水。 仪器: 日立8 50 型荧光分光光度计, p H 计 3 20 一s , 梅特勒一托利多仪器 上海 有限公司 容量瓶 100ml 电分析天平 0.0001g 1.2 主要方法 1.2.1 N aA c 一H A C 缓冲溶液的配制 精密称取2. 7 2g Na A c·3H ZO 晶体, 重蒸水溶解后转移至10 0 m L 的容量瓶中, 用1mol / L 的盐酸溶液调解p H 值为2. 5 , 加重蒸水至刻度, 即得到p H值为2. 5 的Na A c 一HA C 缓冲溶液。 1.2. 2 标准溶液的配制 精密称取0. 0 2g 苯甲酸钠晶体,蒸馏水溶解后定容于l00 m L 容量瓶中, 既可配成0. 2 g/L 的苯甲酸钠溶液。 1.2. 3.l 苯甲酸钠的荧光发射光谱的测定: 以2 7 On m 为检测波长, 从260 一400n m 进行扫描, 窄缝宽度为5n m 。 苯甲酸钠的荧光激发光谱的测定: 以最大发射波长为固定发射波长, 改变激发光波长2 00 -400nm 进行扫描。 2. 4 荧光光谱最佳p H 的确定 准确量取2.5 ml 0. 2 g/L 苯甲酸钠溶液于13 个1O0 m L 容量瓶中, 用0.lm o l/ L HCl 和N a O H 溶液调节p H 值, 加重蒸水至刻度摇匀, 用p H 计准确测定p H , 并测定溶液的荧光发射强度fo 2. 5 标准曲线的测定 准确移取O 、1 、2 、6 、8 、10 m L 0.2g/l的苯甲酸钠标准溶液分别放人7 个100 m L 容量瓶中, 加人10m L pH 值为2.72 的NaAc 一HAc 缓冲溶液, 加蒸馏水至刻度, 以缓冲溶液为空白对照测荧光强度。 2. 6 标准加人法测苯甲酸钠的浓度 精确移取0 、1 、1.5 、2 、3 、4mL 0.2g/l苯甲酸钠标准溶液分别放人6 个5 0 ml 的容量瓶, 各加5mlNaA c 一H A c 缓冲溶液和lmL 饮料式样, 再加重蒸水至 刻度, 以缓冲溶液为空白对照测各溶液的荧光强度 2 结果与讨论 1 苯甲酸钠的荧光光谱 . 1 苯甲酸钠的荧光发射光谱 以2 7 0 n m 为检测波长, 从26 0 一4 0 0 n m 进行扫描, 得苯甲酸钠的荧光发射光谱如图1 所示。其最佳发射光波长为315n m 。 2 苯甲酸钠的荧光激发光谱 以最大发射波长3 15n m 为固定发射波长, 改变激发光波长200-400nm 进行扫描, 得苯甲酸钠的荧光激发光谱如图2 所示, 其最佳激发波长为2 24 n m 。 荧光光谱最佳p H 随着p H 的增大苯甲酸钠的荧光强度增大, 当p H 达到2. 01 是荧光强度达到最大,随之荧光强度开始降低, 达到5.25 后荧光强度达到0, 因pH 值在1.76 一3 范围内时荧光强度较大, 故测定较合适的p H 值范围为1.7 6 一3 , 为方便试验我们选取合适的pH 为2 一3, 实验中的pH 为2. 5。 2. 3 标准曲线的测定 苯甲酸钠的浓度基本上和荧光强度是成正比的, 其线性相关方程为f 6.58757c + 0. 0 3 59 , 相关性系数r 0.9999 , 即其相关性较好。 2. 4 标准加人法测定的苯甲酸钠浓度 由图5 可知, 样品的荧光强度f 与苯甲酸钠的加入体积呈直线关系, 其方程为: f 11 .989v+ 13.404, r 0.9978 。当荧光强度为零时, 可计算出加人苯甲酸钠的浓度为: V -0. 9 9ml , 因此可得到样品中的苯甲酸钠的浓度为: V 样 0. 2*0.9 9 /1 0.198g/l 0. 19 6 g/Kg ,故此样品所含苯甲酸钠在规定范围之内, 但已接近规定范