实验9饲料中粗纤维的测定.docVIP

实验九、饲料中粗纤维的测定 一、实验目的 使学生掌握用饲料中的用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醚、乙醇除去醚溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量称为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下，测出的概略养分。其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。ml，预先加入30ml酸洗石棉悬浮液。再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜； 7、消煮器：由冷凝球的高型烧杯（50ml）或有冷凝管的锥形瓶； 8、锅滤装置：抽真空装置，吸滤瓶及漏斗； 9、滤器：200目不锈钢网和尼龙网，或G2号玻璃滤器； 10、干燥器：用氯化钙 干燥试剂 或变色硅胶作干燥剂。 四、实验内容 1、称样：称取1～2g试样，准确至0.0002g，如果脂肪 1%可不脱脂，1~10%可不必脱脂，但建议脱脂，脂肪 10%必须脱脂，或用测脂肪后残渣。 2、酸煮：加入0.255±0.005mol/L煮沸的硫酸200ml和1滴正辛醇，使其在2min沸腾，且连续微沸30±1min。注意保持硫酸浓度不变，样品不可损失。 3、过滤：用沸蒸馏水洗至不含酸。 4、碱煮：将酸洗不溶物放入原容器中，加浓度准确为0.313±0.005mol/L且已沸的氢氧化钠溶液200ml，同样微沸30min。 5、过滤：先用25ml0.255mol/L硫酸洗涤，再用沸蒸馏水洗至中性，用乙醇15ml洗残渣。 6、烘干灰化：取下坩埚，130℃烘干至恒重。550±25℃灼烧30min，冷却称重至恒重。 7、计算结果： 1976年Van Soet提出了中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素作为评价饲草纤维类物质的指标。 NDF：木质素、纤维素、二氧化硅、半纤维素、细胞壁的成分如镶嵌微量的蛋白质 ADF：木质素、纤维素、二氧化硅 ADF-NDF 半纤维素 ADF-ADL 纤维素 该法可以分别测出纤维素，半纤维素、木质素和硅酸盐，这量一大进步，但该法提取出的纤维物质中残留含氮尚有20~50%（有可能不消化），在NDF还有淀粉残留，使准确性下降，该法不适于纤维量低的精料（蛋白质或淀粉多的试样），因此也叫饲草分析方案。 Fonnesback（冯列士贝克）于1970～1974年提出冯氏法。 （1）先用蛋白酶将饲料进行消化（pH 3.5），然后用酸性洗涤剂煮沸1h，使原饲料中95%以上的蛋白质被消化。 （2）将上步分离出的细胞壁用40%硫酸煮1h，使半纤维素水解，过滤残渣为纤维素和木质素，酸不溶灰分，1步-2步 半纤维素含量。 （3）将上步所得的残渣用72%硫酸处理3h，过滤洗涤残渣，105±2℃烘干，称重，然后灼烧称重，木质素逸失，剩余为二氧化硅。 五、作业 完成计算的全过程及结果