药理学实验方法资料.doc

药理学实验方法 第－讲 实验动物的选择 在药理学实验中，要根据实验目的，选择不同动物，常用动物有： １、青蛙和蟾蜍 心脏（离体、在体）实验, 制备坐骨Ｎ－腓肠标本等。 ２、小白鼠： 药物初筛：镇痛、耐缺氧、抗肿瘤药物、LD５０测定、避孕药实验等。 ３、大白鼠： 抗炎作用，大白鼠踝关节肿胀实验， 血压测量，胆管插管等。 长期性毒性试验。 ４、豚鼠： 对组胺敏感，并易于致敏，常用抗过敏药（平喘药、抗组胺药）实验。离体心房、心脏、肠管实验等。 豚鼠对结核菌也敏感，也用于抗结核病药物实验。 兔： 家兔易得，驯服，便于静脉注射和灌胃，常用于观察药物对心脏的作用和对CNS的作用。 又由于其体温变化较敏感，也常用于体温实验及热原检查。 家兔也常用于避孕药实验。 猫： 猫的血压比较稳定，具有咳咳嗽反射和呕吐动作。因而常用于心血管药物实验和镇咳药、镇吐药实验。 狗： 狗的血压比较稳定，常用于降压药、升压药和抗休克药实验。 狗比较容易驯服，最适用于慢性实验。手术造瘘（胃、肠）以便观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。 此外，长期毒性实验也常用狗来进行。 * 附:给药途径及剂量限制 1. 小白鼠 灌畏法:0.1～0.25ml／10g体重。 皮下注射：0.1～0.3ml／10g体重。 肌肉注射：0.2ml／每侧。 腔注射：0.1～0.25ml／10g体重。 静脉注射：0.05～0.1ml／10g体重。 大白鼠 （1） 灌畏法:2.0ml／10og体重。3.0ml/只。 （2） 腔注射：0.1～0.25ml／10g体重。 第二讲 实验动物的麻醉和处死 各种实验动物的麻醉药物和麻醉方法 1、乙醚 乙醚为挥发性麻醉药。常用于小动物（小鼠）的麻醉。使用方法有：开放发和封闭法。 戊巴比妥钠 戊巴比妥钠的作用稳定、麻醉持续时间中等(一次给药可维持作用2～4 hr)，一般实验均可使用。 常用其3% 溶液。 各种动物所用剂量如下： 狗：30mg/kg， iv 猫、兔：30～40mg/kg，iv或ip 大鼠、小鼠：40～50mg/kg，ip 乌拉坦 乌拉坦的作用较弱，对呼吸的抑制作用小是其优点。是动物实验常用的麻醉药。 各种动物所用剂量如下： 家兔、大鼠：1.0～1.5 g/kg，iv或ip 氯醛糖 氯醛糖对血压和神经反射影响较小，适用于心血管实验。 但其溶解度小，常用浓度为1% 。 动物所用剂量如下： 狗、猫：80～100mg./kg，iv或ip。常与戊巴比妥钠或乌拉坦合用，合用时应减少剂量。 动物的处死 乙醚吸入法 小鼠、大鼠：吸入乙醚后20～30秒钟进入麻醉壮态，3～5分钟死亡。 鸽、猫等较大动物也可用次法处死。 但需注意以下两点： 当用次法处死豚鼠时，脑和肺部可出现小出血点，在进行病理解剖时要特别注意。 焚烧动物尸体时要注意防止火灾发生。 二氧化碳吸入法 可将动物装入减压干燥器或塑料袋内，通以CO2，可在本30秒～3分钟内杀死动物。 豚鼠、猫、鸽等均可用此法处死。 注射麻醉法 常用药物为巴比妥钠，各种动物所需剂量如下： 鸽：100mg/kg，ip。 猫：60～120mg/kg，iv或ip。 狗：100mg/kg，iv。 兔：75～100mg/kg，iv。 颈椎脱臼法 此法常用于小白鼠的处死。 空气栓塞法 将空气注入静脉或心腔内造成栓塞。各种动物所需剂量如下： 兔、猫：10～20ml/只。 狗：70～150ml/只。 心脏取血法 豚鼠、猴可用此法。 大量放血法 兔、猫、猴、狗等可用此法。 电击法 220 V交流电，接上粗针头，一头插入颈部皮下，一头插入腰部皮下，通以电流。 第三讲 药理学实验设计 第一节 药理学实验设计的基本要求 实验设计的三大原则──重复，随机，对照。 重复 影响因素设法控制： 动物：品种、体重、年令、性别、饲养条件。…… 药物：批号、纯度、剂量、注射容量、速度。…… 仪器：灵敏度、精确度、电压稳定性。…… 其它：室温、气压、季节、上、下午。…… 条件控制越严格，重复性越高，但样品的代表性越差，这是一个不可避免的矛盾。一般先严后松，逐渐扩大实验范围。 随机 随机分组的目的，使各组间不受主观因素的影响，方法：编号抽签或随机数字表法。 目前主张“均衡下的随机”，即先将主要因素（体重， 性别等）均衡归类分档，再将难控制的因素（活泼程度 饥饱程度 疲劳程度 性周期……）随机安排。 对照 阴性对照（空白对照）──N.S. 2、阳性对照（标准品组），目的是查明： 实验条件是不是发生了改变。 判断和对比试药的作用。