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非洲紫罗兰转基因过程中的抑菌分析 摘要：以农杆菌介导法将白桦花发育相关基因Bp1AGL对非洲紫罗兰（Saintpaulia ionantha Wendl）进行遗传转化，通过设置单一变量研究转基因过程中的抑菌方法。结果表明，在暗培养60 h，侵染时间为6 min，农杆菌活化菌液OD600 nm为0.5，暗培养覆盖无菌纸膜的条件下，抑菌效果良好，转基因效率更高。 关键词：非洲紫罗兰（Saintpaulia ionantha Wendl）；转基因；BplAGL；抑菌 中图分类号：Q785 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）05-1301-03 DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.05.054 Analysis on the Bacteriostatic Test of the Transgenic Process of African Violet GUO Hui-yan1， HAO Ai-ping1， JIA Yuan-yuan2， LI Ji-guang1， ZHANG Xiao-jun1 （1. Department of Life Science and Technology， Mudanjiang Normal College， Mudanjiang 157012， Heilongjiang， China； 2. State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding， Northeast Forestry University， Harbin 150040， China） Abstract：Bp1AGL gene related to floral development from Betula platyphylla was introduced into African violet （Saintpaulia ionantha Wendl） by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. On this basis， the bacteriostatic methods by setting single variable in the transgenic process were studied. The results showed that the dark cultivate time was 60 hours， the infection time was 6 minutes，the OD600 nm value of agrobacterium was 0.5，and covered sterile paper film in the dark cultivation stage， bacteriostatic effect and transgenic efficiency were higher than other methods. Key words： African violet（Saintpaulia ionantha Wendl）；transgene； BplAGL；bacteriostatic 自1983年世界上第一例转基因烟草问世以来，植物转基因技术发展迅猛。目前，全球试种的转基因植物超过4 500种，种植面积达到5 870 hm2以上，其中大豆、棉花、油菜、番茄、马铃薯、烟草、南瓜、甜瓜等8种转基因作物34个品种实现商品化生产[1，2]。杨郁文等[3]首次将花分生组织决定基因APETALA1转入油菜，并且通过分子检测和性状观察证明了APETALA1基因成功转入并得到了有效表达，转基因油菜植株生长正常，花形、花色与野生型无明显差异，且开花期比未转基因油菜提前近15 d。谭琳等[4]利用DNA直接导入法将含有SARS S1基因的植物表达载体pCS1导入农杆菌LBA4404中，并通过农杆菌介导的叶盘转化法得到12株再生番茄小苗，PCR、Southern杂交检测结果证实，有6株为转基因植株。李司等[5]以胡萝卜种子的下胚轴为外植体，分别将2种不同外源目的基因导入农杆菌LBA4404进行遗传转化，经PCR、Southern-blot和RT-PCR检测，选取转基因成功并正常转录的T1代植株分别进行有性杂交，获取T1代杂交种子。同年秋季播种长出T2代植株，经检测得到含有2种目的基因且蛋白表达量较高的转基因胡萝卜。杨光等[6]利用相同试验体系对VvAG、VvAP3、VvFLC、VvFUL、VvFT、VvAP2、VvSOC1等7个花发育相关基因进行了亚细胞定位，这些基因在葡萄的花、果实以及营养器官中都有不同程度的表达。丁燕等[7]用R