山东部分小麦种质的多酚氧化酶活性分析.docVIP

山东部分小麦种质的多酚氧化酶活性分析 重点实验室/小麦玉米国家工程实验室，山东济南 250100） 摘 要：选取430份山东地方品种、124份育成品种和180份高代品系进行籽粒多酚氧化酶（PPO）活性测定，从中筛选到27份PPO活性较低的品种（系），可作为优质的低PPO活性的种质资源。 关键词：山东；小麦；种质；PPO活性；品质改良 中图分类号：S512.1+10.1（252）文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）03-0025-03 小麦是世界性的重要粮食作物之一，2011年全球总贸易额达6.8亿吨，提供了人类20%的能量消费，同时小麦也是重要的蛋白质、维生素和矿物质来源[1，2]。随着经济的发展与人们生活水平的提高，消费者在注重面制品营养品质的同时也越发重视其外观品质，对面条、馒头、饺子、包子等传统面食的表观色泽提出了更高的要求。 多酚氧化酶（PPO）是影响面制品色泽的主要因素， 面粉或籽粒的高PPO活性会造成面制品褐变，严重影响小麦面粉及其面食品的品质[3～6]。尤其面条的表观品质与PPO的活性有很大的关系，Baik等（1995）[4]研究表明，面粉的PPO活性 大量研究表明小麦籽粒PPO活性存在很大差异，主要受多基因型控制。Jimenez和 Anderson等[8，9]通过遗传分析推测控制小麦 PPO的主效基因为 1～2个，同时指出针对 PPO底物的专化性存在多个等位基因。葛秀秀等（2004）[10]认为PPO活性受2对独立主基因控制。可见，通过遗传改良途径降低小麦品种的PPO活性，是小麦品质育种的重要策略。小麦种质资源是遗传改良的基础，分析小麦种质的PPO活性，可为有效地进行品质改良奠定基础。本研究测定了430份山东地方品种、124份育成品种和180份高代品系的PPO活性，从而了解当前的品质育种状况，为今后小麦品质育种的亲本选择提供依据。 1 材料与方法1.1 供试材料 供试的小麦种质包括430份山东地方品种、124份育成品种和180份高代品系，由山东省农业科学院作物研究所资源研究室保存。 1.2 试验方法 小麦籽粒PPO活性的测定，参照Anderson等[9]的方法进行，略有改动。每份材料称取3份含15粒种子（提前称量各份种子的重量）的样品，放入20 ml玻璃瓶中，加入4.5 ml反应试剂，放在混旋器上混合，使样品充分湿润并与反应试剂充分接触以便于反应的进行；把样品瓶放在往复振荡机上振荡（样品充分暴露在空气中），同时计时，0.5 h后再放在混旋器上迅速混合，使样品颜色一致；马上将样品放在冰块上以终止反应；以空白L-DOPA/MOPS溶液作为对照进行比色，使用可见分光光度计，取1.0 cm比色皿，在475 nm下测定上清液的吸光度A。 反应试剂现配现用，成分如下：50 mol/L、pH 6.5的MOPS[3-（N-morpholino） propanesulfonic acid]缓冲液（1.0465 g+100 ml水）；10 mol/L L-DOPA（L-3，4-dihydroxyphenyl alanine）溶液（0.1972 g+100 ml MOPS）。 1.3 结果计算 PPO活性 A/（30 min×15粒种子克数） ×103。A为在475 nm下测定的上清液吸光度；PPO活性单位为A475/（min?g?103）。 2 结果与分析 2.1 不同类型种质的PPO活性差异 由表1看出，所测定734份种质的PPO活性变异幅度为2.90～53.41 A475/（min?g?103）。其中地方品种的PPO活性变幅为3.61～53.41 A475/（min?g?103），育成品种的PPO活性变幅为2.90～40.23 A475/（min?g?103），而当前本课题组的高代品系的PPO活性变幅为8.77～47.55 A475/（min?g?103）。从PPO活性的平均值看，地方品种和前期的育成品种分别为13.63和14.21 A475/（min?g?103），差异不显著；高代品系的PPO活性值为23.22 A475/（min?g?103），与地方品种和前期育成品种差异显著。本研究将PPO活性值低于5 A475/（min?g?103）的小麦种质认定为低PPO活性种质，其中地方品种低PPO活性种质14份，为被测地方品种的3.25%；前期育成品种低PPO活性种质13份，占被测定育成品种的10.5%；而高代品系中没有低于5 A475/（min?g?103）的小麦种质。 2.2 低PPO活性小麦种质 表2列出了本研究中测定的PPO活性低于5 A475/（min?g?103）的小麦种质，其中小于3 A475/（min?g?103）的种质有育成品种鲁资65213和地方品种大粒半芒；PPO活性在3～4 A475/（m