第七章-2微生物初级代谢产物的代谢调控解析.pptVIP

微生物细胞有着一整套可塑性极强和极精确的代谢调节系统，以确保上千种酶能准确无误、有条不紊和高度协调地进行极其复杂的新陈代谢反应。 在发酵工业中，调节微生物生命活动的方法很多，包括生理水平、代谢途径水平和基因调控水平上的各种调节。 酶活性的调节包括两种方式： 意义 通过控制所缺营养物的添加量，就可遗传性地解除终产物的反馈抑制，使得终产物或另一分支途径的末端产物得以积累。 结构基因突变 酶失活 酶活性中心 结构复原，但调节中心结构未复原 因此，利用此突变株提高产量。 微生物细胞生长需要一些代谢物用于细胞组分的合成。如果将代谢物的结构类似物（拮抗物）加入培养基中，它们能够和代谢物竞争性地与变构酶或阻遏物结合。但它们不能够代替正常代谢物用于合成细胞成分，所以它们在细胞中的浓度不会降低，因此它们与变构酶的结合是不可逆的，这就使得有关酶的合成不可逆地停止或催化作用不可逆地被抑制——拮抗物假反馈抑制机制。 如果变构酶基因发生突变，变构部位不能与拮抗物结合，但其活性部位不变，或者调节基因发生突变，使调节蛋白不与拮抗物结合，那么终产物也同样不能与结构发生改变的变构酶结合。 因此，在细胞大量合成终产物时仍能继续合成有关的酶。 意义：代谢控制发酵育种的主流，特别在氨基酸、核苷酸发酵育种中。 与营养突变株相比，优点： （1）代谢调节遗传性地解除，不在受培养基成分的影响，生产比较稳定； （2）如找到产物的拮抗物，选育抗拮抗物突变株方法简单、易得； （3）可有效阻止回复突变（保存培养基中添加适量拮抗物），易于保存。 复习题 1.在化能异养微生物的生物氧化中，其基质脱氢和产能途径主要有哪几条？试比较各途径的主要特点。 2.试比较有氧呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点。 3.微生物调节代谢流的主要方式有哪两类？反馈抑制有哪几种类型？ ▼ 合作反馈抑制 两种末端产物同时存在时，共同的反馈抑制作用大于二者单独作用之和。 如嘌呤核苷酸的合成，磷酸核糖焦磷酸酶受AMP和GMP （和IMP）的合作反馈抑制，二者共同存在时，可以完全抑制该酶的活性。而二者单独过量时，分别抑制其活性的70%和10%。 ▼ 积累反馈抑制 每一分支途径末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中前面的酶，所以当几种末端产物共同存在时它们的抑制作用是积累的，各末端产物之间既无协同效应，亦无拮抗作用。 如 E.coli谷氨酰胺合成酶的调节。 ▼ 顺序反馈抑制 一种终产物的积累,导致前一中间产物的积累，通过后者反馈抑制合成途径关键酶的活性，使合成终止。 如 枯草芽孢杆菌芳香族氨基酸合成的调节。 ▼ 代谢互锁 一种氨基酸的合成受到另一种完全无关的氨基酸的控制，而且只有当该氨基酸浓度大大高于生理浓度时才能显示抑制作用. 如赖氨酸的生物合成与亮氨酸的生物合成之间存在着代谢互锁 在分支合成途径中，分支点后的两种酶竞争同一种底物，如AMP与GMP，Thr与Lys、Met，由于两种酶对底物的Km值（即对底物的亲和力）不同，故两条支路的一条优先合成。 ▼优先合成 酶活力调节的机制—变构酶理论 变构酶为一种变构蛋白，酶分子空间构象的变化 影响酶的活性。它具有两个以上立体专一性不同的接受部位，一个是活性中心（底物结合），另一个是调节中心（调节物结合）。 反馈抑制和阻遏的概念 反馈抑制：是指代谢途径的终产物对催化该途径中的一个反应（通常是第一个反应）的酶活力的抑制，其实质是终产物结合到酶的变构部位，从而干扰酶和底物的结合。与此相反为酶活性的激活。 反馈阻遏：是指终产物（或终产物的结构类似物）阻止该途径的一个或几个反应中的一个或几个酶的合成，其实质是调节基因的作用，这是微生物不通过基因突变而适应于环境改变的一种措施。与此相反有酶合成的诱导。 四、细胞膜通透性的调节 细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的屏障。 细胞从外部环境中吸收营养物质或将细胞内代 谢产物分泌至细胞外，都要通过细胞膜。细胞 通过对膜透性大小的调节实现对代谢过程的部 分调节。 1.通过细胞膜缺损突变而控制其渗透性： 筛选透性突变株 2.解除反馈抑制 当细胞膜完整时，透性小，细胞内的某代谢产物不能及时分泌到细胞外部，在细胞内不断累积，至其浓度达到一定程度时发生反馈抑制，导致该代谢产物合成减慢或停止。 0 2.5 10 1.3 30.8 3.7 生物素(μg/L) 谷氨酸(g/L) 谷氨酸生产过程发酵液中生物素与谷氨酸含量的关系 此外，加入青霉素等抗生素和吐温80等脂肪酸衍生物，都能增大膜的通透性，从而促进细胞内谷氨酸向细胞外大量分泌，以解除反馈抑制。 五、代