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怀地黄的茎尖组织培养和快繁技术研究 摘要 研究怀地黄组织培养与快繁技术。以怀地黄茎尖部分为外植体，在以MS作为基本培养基的基础上，添加不同浓度的NAA、IAA、2，4-D、6-BA，配制不同浓度的培养基，对怀地黄的茎尖进行分化与诱导、继代与增殖及生根培养试验，并对试管苗进行炼苗移栽。获得了怀地黄茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基，以及生长所需要的外部条件和配套技术。 关键词 怀地黄；组织培养；快繁；培养基 中图分类号 S656.23+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）06-0104-01 Study on Tissue Culture and Rapid Propagation Technology of Rehmannia Glutinosa Libosch DING Fang HOU Qian-qian LIU Guang-qing SUN Xi-yun SUN Feng-ling （Shangqiu Academy of Agriculture and Forestry in Henan Province，Shangqiu Henan 476000） Abstract The paper aimed to study thevirus-free tissue culture and the rapid propagation technology.With Rehmannia glutinosa Libosch shoot tip as explants，MS was used as the basic medium with different concentration of NAA，IAA，2，4-D and 6-BA to configure different media，the tests of differentiation and induction，subculture and proliferation as well as rooting culture on Rehmannia glutinosa Libosch were carried out and the test-tube plantlets were hardened and transplanted.In the experiment，the media of detoxification and induction，proliferation and rooting were obtained as well as the external environmental conditions for the plant growth and the matching technology. Key words Rehmannia glutinosa Libosch；tissue culture；rapid propagation；culture medium 地黄为玄参科多年生草本植物，具有抗衰老、抗肿瘤、降血糖等功效，影响内分泌系统、心脑血管系统、中枢神经系统、造血系统等的活性，有助于调节免疫功能。地黄在我国分布广泛，可见于山西、河南、陕西、内蒙古、山东、安徽、河北、四川等地，以河南的温县、孟县、博爱为地黄的道地产区。主要为大田栽培。 怀庆地黄是指产于古怀庆府的地黄，是著名的“四大怀药”之一[1]。针对目前地黄病毒病尚无安全有效药物进行治疗的现状，通过植物茎尖脱毒技术，利用植物营养体进行快速繁殖，以保持原品种全部的遗传性，实现该品种种质的一致性。 1 材料选择 选择正在生长的怀地黄的茎尖。 2 培养条件 地黄的组织培养与快速繁殖以MS为基本培养基，在此基础上添加萘乙酸（NAA）、6-苄基腺嘌呤（6-BA）、二氯苯氧乙酸（2，4-D）、吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）。其中，①诱导与分化培养基：MS+0.3 mg/L 6-BA+0.02 mg/L NAA+0.1 mg/L GA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L琼脂；②继代与增殖培养基：MS+0.3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L琼脂；③生根培养基：1/2 MS+0.05 mg/L IAA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L琼脂。以上培养基的pH值为5.6～5.8，均分装于培养瓶中，封口后，高压灭菌20 min，待用。培养条件：温度（26±2） ℃，湿度65%～70%，光照强度为2 000～2 500 lx，光照时间12～14 h/d。 3 无菌材料的获得和培养 从正在生长的植株中，选择无病虫、健壮、长势强、具有品种特征、长2～3 cm的茎尖部，去掉可见叶，用10%洗洁精溶液浸泡8～10 min后，再用流