陈晓菲论文汇报幻灯片.pptVIP

2 研究内容与方法 健康对照组：同期正常健康体检成人 22例,均选自2013年3月至2013年5月 在安徽省立医院体检中心体检的成人, 男15例,女7例。年龄44～80岁，平均 年龄(59.63±9.81)岁。 对照组入选及排除标准：实验前2周 内身体健康,无感染性疾病。均系无 心、肝、脑、肾和免疫、感染性疾病 及糖尿病的健康成年人,头部MRI检查 无颅内疾病。 （2）标本采集： 受试者均于清晨空腹状态下抽取肘静脉血2~3 ml,肝素抗 凝,标本在采集后2h内测定。 2 研究内容与方法 （3）标本处理 取2支FCM试管，分别标记为染色管和对照管，用微量移液器在各标记试 管中分别均加入100 ?l抗凝血，染色管中加入CD25-PE、CD4-FITC各10 μl及CD127-PE 2.5 μl，对照管加入CD4-PE和IgG1-FITC各10 μl，血液 和试剂确保加入管底,不要沾在试管壁上; 震荡器上充分混匀,使抗凝全血与 荧光标记的单克隆抗体充分接触,室温避光反应15 min； 加入溶血剂2 ml，充分震荡混匀,室温避光反应10 min，加入生理盐水2 ml，1 500 rpm离心5 min弃上清,取500 μl立即上流式细胞仪检测； 2 研究内容与方法 (4)流式细胞仪检测： 每次检测前常规用荧光微球和同型阴性对照试剂对仪器进行质量监测和调控