酵母细胞的收集辩析.pptVIP

* 酵母细胞的收集 目标： 从酿酒酵母培养液中收集酵母细胞。 原理： 酵母中含有蔗糖酶，而蔗糖酶属于胞内酶，所以常将细胞壁破碎后进行提取。本法先采用离心法收集新鲜酵母细胞，再采用菌体自溶方法来破碎细胞壁，使细胞内的蔗糖酶释放出来。 操作方法： ——酵母细胞的收集 在50ml塑料离心管中装入45ml新鲜酿酒酵母发酵液，3000转/分钟离心10分钟，小心移除上清液。再往离心管中加30ml无菌生理盐水，震荡离心管。使酵母细胞沉淀重新悬浮与液体中，3000转/分钟离心10分钟，小心移除上清液，得到新鲜的酿酒酵母细胞沉淀。 实验结果： 酵母细胞沉淀结果为：0.94g 注意点： 使用离心机时注意平衡问题，使用离心管前应先称量空离心管质量。 结果分析： 酵母菌达不到25g，没达到要求。 酵母细胞的自溶 目标： 从酿酒酵母液中收集酵母细胞，并使之自溶。 原理： 酵母中含有蔗糖酶，而蔗糖酶属于胞内酶，所以常将细胞壁破碎后进行提取。本法先采用离心法收集新鲜酵母细胞，再采用菌体自溶方法来破碎细胞壁，使细胞内的蔗糖酶释放出来。 操作方法： ——酵母自溶 在收集有25g酵母细胞沉淀的500ml三角瓶中加入醋酸钠1.6g，搅拌15~20分钟，使团块的鲜酵母液化，加1.5甲苯，用保鲜膜密封瓶口，摇动10分钟使甲苯和酵母液充分混匀，加入37℃培养箱中保温60小时，使酵母自溶。 实验结果： 细胞自溶：破碎