细胞工程第五章染色体工程曹君迈完成.pptVIP

第一节染色体变异 与染色体有关的几个概念 第二节染色体工程 染色体工程研究的主要内容 1.人工诱导多倍体的方法 P191 1939年，Frankhauser和Griftiths首先在两栖类中成功地诱发了三倍体。 由于多倍体动物具有生长速度快，成活率高及抗病能力强等特点，所以人工诱导多倍体，改善动物经济性状倍受重视。现在，该技术已成为低等经济动物育种的主要技术之一，其成果已经应用于生产实践，取得了明显的经济效益和社会效益。 （1）生物学方法 （2）物理学方法 温度休克法：冷休克法（0～5℃）和热休克法（30 ℃左右）。 定义：用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。 关键：能否成功地阻止第二次成熟分裂或第二极体的排出。要达到这一点，必须考虑温度处理的开始时间（TA）、处理持续时间（D）和处理温度（T）这三个因素。 目前对鱼类使用温度休克法诱导三倍体的工作报道较多。一般来说，冷水性鱼类如鲑科种类应用热休克法、而温水性鱼类用冷休克效果较好。 优点：廉价、易操作，是诱导动物细胞多倍体化的常用手段，也有利于大规模生产使用。 物理学方法 水静压法：采用较高的水静压（65N）来抑制第二极体的放出或第一次卵裂产生多倍体。 这种方法诱导率高（一般在90％～100％）、处理时间（3～5min）短，对受精卵损伤小、成活率高。 但是，该法需要专门的设备——水压机，成本较高，其样品室容量有限，处理卵的量有限，所以不适于大规模生产的。 （3）化学方法 有些化学物质也可以用来阻止第二极体的排出或受精卵的有丝分裂而产生三倍体或四倍体。 细胞松弛素B能抑制肌动蛋白聚合微丝，从而抑制细胞质分裂。 秋水仙碱可以抑制细胞分裂中纺锤丝的形成，因而抑制有丝分裂，这在植物中已经广泛应用。 其它药物还有麻醉剂，如N2O、CHClF2和聚乙二醇等。 缺点：化学药品一般比较昂贵、且具有毒性，影响处理后的胚胎发育，同时加上化学药物诱导产生的多倍体往往是在育种上没有价值的镶嵌体，所以化学方法在实际中的应用不及物理方法。 多倍育种的优点和缺点 优点：多倍体育种技术方法简单、见效快，具有潜在的理论和应用价值。 缺点：还有一些难点比如准确的处理时间、诱导率、成活率、孵化率、倍性鉴定方法等还未解决，但随生命科学的进一步发展，多倍体育种技术将为人类做出更大的贡献。 多倍体育种的应用 P194 存在问题与展望 P195 二.单倍体育种 2.单倍体育种的优越性具体表现 三.雌、雄核发育 雌核发育（gynogenesis），俗称假受精，意指精子虽然正常地钻入和激活卵子，但精子的细胞核并未参与卵球的发育，精子的染色体很快消失，胚胎的发育仅在母体遗传的控制下进行。 自然界中一些无脊椎动物和鱼类等存在。 人工诱导雌核发育是指用经过紫外线、X射线或Y射线等处理后的失活精子来“受精”，再在适当时间施以冷、热、高压等物理处理，以抑制第二极体的排出，使卵子发为正常的二倍体动物。 凡雌核发育的个体，都具有纯母系的单倍体染色体组，依赖于卵子染色体组的二倍体化。 历史 1911年，赫特威氏就第一个成功地人工消除了精子染色体活性，并发现了“赫特威氏效应”。 赫特威氏效应指只有在适当的高辐射剂量下，才能导致精子染色体完全失活，届时精子虽能穿入卵内，却能起到激活卵球启动发育的作用。 鉴定方法 鉴别雌核发育的个体，通常以颜色、形态以及生化等方面的指标为依据，也可以通过细胞学的研究。 若是雌核发育，其囊胚细胞中只出现一套来自雌核的染色体，否则雌核和雄核染色体各占一半，得到的是杂交种。 用遗传标志的方法来鉴别雄核发育的二倍体化，即由第一次有丝分裂的阻碍，还是由保留极体而来。假如二倍体源自第一次有丝分裂的抑制，杂和雌性个体的子代应该都是纯合型；而如果是通过阻止第二极体的外排产生的雌核发育个体，则子代的情况取决于着丝点与基因间的距离。在着丝点－基因距离远离时，将明显增加杂和型子代的比例。 雌核发育的意义 雌核发育具有产生单性种群的能力，用之已经成功地得到100％草鱼、鲤鱼的雌性个体，其核型与同型雌性配子一样，但也不可避免地会导致后代的近亲繁殖的衰退，因此其实际应用价值有待研究。 能得到同源型的二倍体克隆，在育种上具有重要性，也提供了一种优越的研究品系。 如果用激素致使性反转为雄性，再与同胞姐妹交配，可以获得强壮的纯系同型配子的二倍体。 借助雌核发育，可以得到新的纯系来筛选，除去有害的等位基因，改良近亲繁殖系。 雄核发育（androgenesis）是指因经过紫外线、X射线或Y射线处理的卵子与正常的精子受精，再在适当时间施以冷、热或高压等物理处理，使进入卵子内的精子染色体加倍，而发育成为完全为父本性状的二倍体。 雄核发育的个体的生存率非常低，这是由于精子基因型的纯合性、卵子由于照