缬草挥发油β—环糊精包合物的制备与评价.docVIP

缬草挥发油β—环糊精包合物的制备与评价 　　[摘要]该研究以提高缬草挥发油的稳定性并掩盖其不良气味为目的，制备和评价了缬草挥发油β-环糊精包合物。通过考察包合物得率和缬草挥发油包合率，确定包合物的制备方法后，采用均匀设计法优化包合物的制备工艺与处方。差示扫描量热法（DSC）和X-射线粉末衍射法（X-RD）验证缬草挥发油β-环糊精包合物的形成，并考察其稳定性。饱和水溶液-超声细胞粉碎法显示较好的包合物得率与包合率。在优化条件下，所制包合物得率（84.78±3.23）%，挥发油的包合率（86.23±2.48）%，DSC和X-RD结果表明包合物的形成、β-环糊精包合物明显提高了缬草挥发油的稳定性。 　　[关键词]缬草挥发油；β-环糊精包合物；稳定性 　　缬草Valeriana officinalis L.为败酱科多年生草本植物，具有镇静安神、解痉止痛等功效，用于轻中度抑郁、失眠等的治疗，其制剂是欧美市场上最畅销的天然植物制剂之一[1]。缬草中含有挥发油（单萜类与倍半萜类）、木脂素类、生物碱类、黄酮类、酚羟酸类等成分，对镇静催眠活性成分的研究主要集中在挥发油类以及缬草三酯类。其中，缬草挥发油能明显抑制小鼠的外观行为活动，显著加强戊巴比妥钠及水合氯醛对中枢神经系统的抑制作用，对戊四氮、电刺激所致的小鼠惊厥也有明显的抑制作用[2]。但是，缬草挥发油中的缬草烯酸（valerenic acids）对高湿和高温条件下的稳定性差[3]，且具有不良气味，影响了药效的发挥和患者用药的顺应性。陈洪燕等采用饱和水溶液法，制备了缬草挥发油β-环糊精包合物，但未见产物的表征与稳定性评价[4]。 　　本文以提高缬草挥发油的稳定性和掩盖不良气味为目的，进行了缬草挥发油β-环糊精包合物的制备与评价，以便为缬草制剂的研究提供依据。 　　1 材料 　　JY92-Ⅱ超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；Pyris-1差示量热扫描仪（美国PE公司）；X-射线粉末衍射仪（荷兰帕纳科公司）；GC-14C气相色谱仪（日本岛津公司）；N2000色谱工作站（浙大智达）；PHS-3TC数显pH计（上海天达仪器有限公司）；YG120药物光照实验箱（上海恒谊制药有限公司）；H-PTH-150AKH恒温恒湿试验箱（宏瑞达科技苏州有限公司）。 　　缬草挥发油（江口县苗药生物科技有限公司，批号VO080911）；乙酸龙脑酯对照品（中国食品药品检定研究院，批号110759-200303）；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法 　　2.1 缬草挥发油的含量分析[5-6] 　　本试验采用气相色谱法，以缬草挥发油中含量较高的乙酸龙脑酯[3-4]作为指标，对缬草提取物进行了制剂研究。 　　气相色谱条件：氢火焰离子化检测器（FID）；载气氮气，流速1.0 mL·min-1（50 kp）；空气流量55 kp，氢气流量50 kp；程序升温从70 ℃（2 min）以10 ℃·min-1升至90 ℃（2 min），再以8 ℃·min-1升至125 ℃（10 min）；分流进样；进样口-检测器温度180 ℃；进样量2 μL。 　　乙酸龙脑酯对照品贮备液的制备：精密称取乙酸龙脑酯10.93 mg至量瓶中，加无水乙醇定容，配制成2.186 g·L-1的溶液。 　　内标储备液的制备：精密称取水杨酸甲酯10.71 mg至量瓶中，加无水乙醇定容，配制成2.142 g·L-1的内标溶液。 　　精密吸取乙酸龙脑酯贮备液0.125，0.25，0.5，1.0，2.0 mL置5 mL量瓶中，分别加入内标溶液0.5 mL，以无水乙醇定容，得系列浓度溶液，进样测定（n=3），以乙酸龙脑酯和内标峰面积比（Y）对乙酸龙脑酯的质量浓度（X）线性回归，得回归方程Y = 0.003 8X + 0.014 3，r = 0.999 9，乙酸龙脑酯在54.65～874.4 mg·L-1线性关系良好。 　　2.2 缬草挥发油β-环糊精包合物的制备 　　2.2.1 制备方法筛选[7-9] 饱和水溶液-搅拌法：称取β-环糊精（β-CD）3 g各3份，按37 g·L-1加水80 mL，40 ℃加热使溶解，以3∶1缓慢滴加50%缬草挥发油乙醇溶液2 mL，得环糊精缬草挥发油醇溶液（CD-VO）。恒温条件下对CD-VO磁力搅拌（300 r·min-1）1 h，冷却至室温，冷藏（4 ℃，24 h）后，减压滤过，沉淀以少量水洗涤，并以缬草挥发油二倍量的石油醚分2次洗涤，40 ℃干燥箱内4 h至恒重，研碎，得包合物白色粉末。 　　饱和水溶液-超声法：将上述CD-VO溶液置于普通超声仪超声1 h，冷藏后，同上处理，得包合物白色粉末。 　　饱和水溶液-超声细胞粉碎法：将上述CD-VO溶液用超声波细胞粉碎仪处理100次（500 W，工