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浅谈诱导多功能干细胞研究状况 顾闻喆 （上海交通大学农业与生物技术学院，上海市，200240） 摘要：胚胎干细胞在医学治疗和细胞学研究中有重要意义，但由于种种原因无法实际应用。现有技术能利用特定基因或是特定基因产物等方入体细胞诱导多能干细胞使该体细胞变成为具备如同胚胎干细胞般，具有分化成各式细胞之多功能分化能力，并且可以持续增生分裂诱导多能干细胞诱导多能干细胞诱导多能干细胞 current development situation on iPS cells research Gu Wenzhe Department of Agriculture and Biotechnology;Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, PR China. Abstract: Human embryonic stem cells is important in medical treatment and cytological studies, but for various reasons can not be put in practice. Now we can import a specific gene or gene product of a particular peer into somatic cells and produce ips cells, so that the body cells come to have the possibility of differentiate into a variety of cells and can be sustained proliferation induced pluripotent stem cell division as general embryonic stem cells. In this paper, the concept of induced pluripotent stem cells, the establishment of methods, research advances are introduced, and discuss its future research directions and the difficulties that may arise, provide a reference of understanding this new technology. Key Words: induced pluripotent stem cells; research process; future prospects. 0 引 言 诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells, iPS cells）为利用导入特定基因或是特定基因产物蛋白质）等方式送入体细胞（如皮肤细胞或是肝脏细胞）中，使该体细胞变成为具备如同胚胎干细胞ES细胞般，具有分化成各式细胞之多功能分化能力，并且可以持续增生分裂。 最初是日本人山中申弥于2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4, Sox2, Klf4和c-Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。随后世界各地不同科学家陆续发现其它方法同样也可以制造这种细胞。 最初的思路来自于体细胞核移植入未受精卵细胞内能使该细胞核进行重新编程（可理解为细胞核的去分化），因此认为未受精卵和胚胎干细胞中含有某些能给予体细胞全能性或者多能型的因子此对24个符合此类条件的候选基因进行筛选，采用逆转录转染的方式将这些基因导入鼠体细胞中诱导体细胞成为多能干细胞。巧妙地采用24-1的筛选方式，以确定那些基因对于IPS用处不大。而后进一步采用10-1的筛选方式，最终确定了Oct3/4, Sox2, c-Myc，Klf4这四个因子起关键作用能给予体细胞全能性或者多能型的因子。 iPS细胞建立 （1）分离和培养宿主细胞； 通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞； 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并于胚胎干细胞ES）细胞专用培养体系中培养，同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程； （4）出现ES样克隆后进行iPS细胞的鉴定（细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面）。这项新的技术，在2006年首度由日本京都大学山中伸弥教授团队，将老鼠之纤维细胞制作而成。 3 新方法更高效地制造诱导性多能干细胞 研究人员用来产生诱导性多能干细胞iPSCs 的方法既花时间而且效率又低。按照当前的方法，当把四种转录因子导入成体细胞如皮肤细胞中时，利用上千个皮肤细胞最终只能获