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- 2016-10-19 发布于河南
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高中二年级下学期人教版生物第六章第二节 一、基因工程的基本步骤 (二)、基因的针线——DNA连接酶 第二节 基因工程及其应用 * * * * 基因工程及其应用 怎样让奶牛产出人奶呢? 人的细胞 人乳铁蛋白基因 奶牛的细胞 目的基因 供体细胞 受体细胞 剪刀 运载体 针线 (一) 、提取目的基因 (二)目的基因与运载体结合 (三)将目的基因导入受体细胞 (四)目的基因的检测和表达 1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口? 思考与讨论: 目的基因 目的基因 黏性末端 黏性末端 G C T A T A G C T A T A 2、会产生几个黏性末端? 思考与讨论: 目的基因 基因的运载体 G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G DNA连接酶 作为运载体必须具备哪些条件? 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 3.对宿主细胞无毒害作用。 4.具有某些标记基因,便于进行筛选。 1、常用的受体细胞: 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等 2、常用微生物作受体细胞的原因: 微生物增殖快、代谢快、目的产物多。 3、若运载体是质粒,受体细胞为细菌应作何处理: 应用CaCl2处理 目的是: 增大细胞壁的通透性 操作过程中用到哪些工具? (一)、基因的“剪刀” 1、分布: 主要在微生物中 专一性 3’,5’-磷酸二酯键 一般产生黏性末端(或产生平末端) ——限制性核酸内切酶 二、基因工程的工具 4、结果: 3、切割具体部位: 2、作用特点: G C T A T A G C T A T A 作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 连接的是什么部位? 3’,5’-磷酸二酯键 DNA聚合酶和DNA连接酶的比较 不同点 相同点 DNA聚合酶 DNA连接酶 连接DNA片段 不需要模板 连接的是游离的脱氧核苷酸 需要模板 连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键 (三)、基因的运输工具——运载体 1、功能: 2、常用的运载体: 3、必须具备的条件 4、运载体和载体的比较 运载体 分布 载体 成分 相同点 蛋白质 细胞膜上 作为物质运输的工具 原理: 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 三、基因工程的概念 体外 结 果: 操作环境: 操作水平: 1、基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 转基因的紫番茄 2、基因工程与药物研制 3、 环境保护 超级细菌 讨论:转基因食品安全吗? * *
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