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本科生毕业设计(论文)
中文题目 龙牙百合原生质体制备与电融合条件初探
外文题目 Preparation and fusion of protoplast of longya Lily optimizationt
学 号 0908180009
姓 名 程思睿
学 院 生命科学学院
专 业 生物工程
指导教师 涂艺声教授
完成时间 2013年5月2日
江西师范大学教务处制
目 录
摘 要 3
Abstract 4
1绪论 5
1.1龙牙百合现状以及实验意义所在 5
1.2 原生质体研究概况 6
1.2.2 原生质分离 6
1.2.2.1 影响原生质体分离的因素 7
1.2.2.1.1 酶 7
1.2.2.1.2 酶解时间 8
1.2.2.1.3 pH值 8
1.2.2.1.4 温度 8
1.2.2.1.5 预处理 8
1. 2. 3 影响原生质体电融合的因素………………………………………………………….8
2材料与方法 9
2.1 实验材料 9
2.2 实验方法与思路 9
2. 2. 1龙牙百合的组织培养…………………………………………………………………..9
2.2.2 酶浓度对原生质体产量的影响 9
2.2.3酶解时间对原生质体产量的影响 9
2. 2. 4 离心操作……………………………………………………………………………...10
2. 2. 5原生质体成串状排列的条件测定………………..…………………………………..10
2. 2. 6原生质体电融合的最佳条件测定……………………………………………………10
3结果与分析 12
3.1 龙牙百合原生质体制备条件研究……………………………………………..……..12
3.1.1酶液组成对原生质体产量的影响 12
3.1.2酶解时间对原生质体产量的影响 12
3.1.3原生质体电融合的最佳条件分析 12
4结果总结 14
参考文献 15
附录A 16
A.1.主要试剂 17
A.2主要溶液的配制 17
A.3设备和仪器 18
致 谢 19
摘 要
本文以龙牙百合试管苗为材料，研究了不同浓度的酶液和酶解时间对获得龙牙百合原生质体产量的影响；进一步探究了原生质体电融合适宜的条件。实验主要结果如下： 1 龙牙百合原生质体制备的最佳条件：酶液组成为1%的纤维素酶+1%果胶酶，酶解的最佳时长为3.5小时，。2 龙牙百合原生质体电融合最佳条件为 交流电压 6V 持续时间 50S 直流电压300V 脉冲时间 25μS 脉冲次数为10次
关键词：龙牙百合，原生质体制备，酶液组成，原生质体电融合
Preparation and fusion of protoplast of longya Lily optimizationt
Cheng Sirui
Directed by Professor TU Yisheng
Abstract
This paper, in the preparation of protoplasts of longya Lily enzyme and enzyme solutions of different concentrations on yield of protoplasts from effect to one of the most appropriate data as well as fetching in protoplast electrofusion process in the determination of the most appropriate data. Experimental main results are as follos
1 best conditions for protoplast of longya Lily: enzyme cellulase +1% 1% composed of Pectinase, best time is 3.5
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