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不同生物的复制体系 功能 E.coli λ SV40/人 酵母 起始蛋白 DnaA O T抗原 ORC 解旋酶 DnaB DnaB T抗原 MCM 装配因子 DnaC P T抗原? Cdc6 引发酶 DnaG DnaG Polα-引发酶 Polα-引发酶 聚合酶 PolⅢ的α亚基 Polδ Polδ,Polε 校正 PolⅢ的ε亚基 Polδ Polδ,Polε 滑动钳 PolⅢ的?亚基 PCNA PCNA 滑动钳装配器 ? 复合体 RF-C RF-C 单链结合蛋白 SSB RF-A RF-A 第13章 RNA的转录 转录(transcription):以DNA一条链为模板,在RNA聚合酶作用下,按A-U、G-C配对原则合成RNA的过程。 是不对称转录 模板链, 无意义链:DNA链中只有一条链作为模板; 编码链,有意义链: DNA双链中不做为模板的链; 转录产生初级转录物为RNA前体(RNA precursor),必须经过加工过程变为成熟的RNA。 RNA合成的基本特征: 5’→3’ 方向; 底物三磷酸核苷酸(NTP):ATP/GTP/CTP/UTP 碱基配对:A=U; G≡C 磷酸酯键连接; 不对称转录,以DNA单链为模板。 不需要引物,合成是连续的。 起始转录处的第一个核苷酸是5’-三磷酸; 对一个基因组来说,转录只发生在一部分基因,且每个基因的转录都受到相对独立的控制。 第一节 转录酶 1 原核生物的RNA聚合酶 2 真核生物的RNA聚合酶 1 原核生物的RNA聚合酶(RNA polynerase) 1.1 RNA pol与DNA pol作用的相同点: DNA模板,Mg2+,4种三磷酸核苷。 不同点: (1)RNA pol没有任何校对功能; (2)能起始新的RNA链。 1.2 组成 大肠杆菌RNA聚合酶由多亚基组成, α2ββ’σ称为全酶, 480 KDa ?亚基与全酶结合疏松,很容易与全酶分离。 核心酶可通过静电作用力与DNA发生非专一性和非特异性结合,负责RNA链的转录延伸。 ?因子更替的现象 在细菌受到外界环境的急剧影响时,会改变所表达的基因,产生?因子更替的现象。 如环境温度升高时,大肠杆菌会开启rpoH基因的表达, 其产物?32能识别热激基因的启动子,而正常状态下表达的基因会关闭或表达水平下降。 芽孢菌生活周期过程中生活方式的改变也是通过?因子的更替完成的。 2 真核生物的RNA聚合酶 某些常用的转录抑制剂 2.1 真核RNA聚合酶的结构特点: 分子量500KDa, 含两个大亚基和 7~12 个小亚基。 RNApolⅡ: 大亚基中有 C端功能区 (CTD) CTD中含一保守氨基酸序列的多个重复 Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser C 端重复七肽 不同生物中重复数目不一样(酶活性) CTD: 参与转录起始 真核RNA pol独有。 CTD参与转录 → ⅡA → ⅡO → 使 RNApol易于离开启动子进入延伸过程(10倍) 2.2 线粒体和叶绿体的RNA pol RNA pol较小,更类似于细菌的RNA pol。 RNA pol转录控制也很简单,只转录少数几个基因 。 第二节 启动子与转录起始 一、原核生物的启动子 启动子(promoter):DNA分子与RNA聚合酶特异结合的部
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