培训课件--分子生物学遗传病基因诊断和治疗.PPTVIP

名称 机制 转染效率 用途 优缺点 影响因素 磷酸钙转染法 内吞作用 20%细胞被转染 瞬时表达 1、简单有效 2、适用于贴壁、非贴壁细胞 3、常作首选方法 1、Ca2+，DNA浓度 2、PH值，沉淀反应时间 3、氯喹，甘油和丁酸钠处理 DEAE葡聚糖转染法 抑制核酸酶 内吞作用 在BDC-1，CV-1和COS细胞中较高 瞬时表达 操作简单 1、需高浓度DNa 2、DEAE葡聚糖浓度 3、温育时间 Poly-brene转染法 不清楚 低分子量DNA转染率高于磷酸钙法 CHO细胞的稳定转化子 能得到较多的稳定转化子 1、受体细胞类型 2、转染调控信号 3、DNA浓度 原生质体融合 胞膜融合 50-100%转染，稳定子得率为0.2-0.02% 瞬时表达 稳定表达 1、操作复杂 2、不能进行共转染 3、慎用于筛选营养缺陷型变异株 1、溶菌酶、PEG浓度 2、温育时间 电穿孔 高压在膜上形成微孔 效率较高 瞬时表达 稳定转化 1、需精密仪器 2、可用于动物、植物细胞和细菌 1、电场强度 2、脉冲长度 3、温度，DNA浓度 4、培养液 脂质体 脂膜融合 50-60%转染 瞬时表达 稳定转化 1、操作简单 2、可用于体内试验 1、脂质体质量 2、DNA浓度 胞核微注射法 直接注射 50-100%转染 稳定转化 1、需要特殊仪器 2、处理样品数量少 3、高效 1、注射技术 2、DNA