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学士学位毕业论文 学号：20104084112 兔病毒性出血症、巴氏杆菌病 二联灭活苗的研究和制备 学生姓名：刘卫贞 指导教师：余丽芸老师 所在学院：生命科学技术学院 专 业：制药工程（1） 中国·大庆 2014 年 5 月 黑龙江八一农垦大学 本科生毕业论文任务书 论文题目 兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联灭活苗的研究和制备 学院名称 生命科学技术学院 姓名 刘卫贞 专业班级 制药工程（1） 指导教师 余丽芸老师 课题类型 研究型 毕业论文（设计）的内容摘要 取攻毒后濒死兔或死亡兔的肝、脾、肾经研磨、过滤、灭能制作兔病毒性出血症组织灭活毒液；用兔巴氏杆菌菌种接种在鲜血马丁琼脂（马丁肉汤），上制成菌液；将上述者灭活后按比例混合，利用氢氧化铝胶作为佐剂，制成联灭活苗。对产品进行无菌检验、安全试验和免疫效果检验，结果均合格。 1．课题的任务、目的与意义。2．毕业论文的基本内容和方法。 3．结论及对自己所完成任务的评价。4．其它需要说明的问题。 字数10篇以上阅与课题有关的外文取攻毒后濒死兔或死亡兔的肝、脾、肾经研磨、过滤、灭能制作兔病毒性出血症组织灭活毒液；用兔巴氏杆菌菌种接种在鲜血马丁琼脂（马丁肉汤），上制成菌液；将上述者灭活后按比例混合，利用氢氧化铝胶作为佐剂，制成联灭活苗。对产品进行无菌检验、安全试验和免疫效果检验，结果均合格。 关键词：兔病毒性出血症；巴氏杆菌病；铝胶；联苗 The research and preparation of he double vaccine of rabbit viral hemorrhage disease and pasteurellosis in rabbit Abstract: Inactivation tissue liquid were made using the liver ,spleen and kidney from the death or dying rabbits challenged with rabbit Hemorrhage disease virus. Blood Mattin’s Broth or Mattin’s agarose was seeded with rabbit pasteurellosis in order to made inactive bacterial. These two inactive virus and bacteria were mixed in proportion and Al(OH)3 were added as adjuvant .This double vaccine were tested by asepsis test ,security test and immunity test. Key words : Rabbit viral hemorrhage disease；Pasteurellosis in rabbit；gelatin alumina；the double vaccine 1 1材料和方法 1 1.1 菌（毒）种 1 1.2 试验动物1 1.3 培养基 1 1.4 氢氧化铝按常规方法制备 2 2 疫苗的制备 2 2.1 菌（毒）液的制备 2.2 疫苗配制 3 疫苗的检验结果 3.1 无菌检验 3.2 安全试验 3.3 效力检验 4 4 结论 讨论 5.1 4 5.2 5 5.3 5 5.4 5 参考文献 6 致谢 7 前言 1 材料和方法 1.1 菌（毒）种 兔病毒性出血症病毒毒种、兔巴氏杆菌冻干菌种均由黑龙江省生物制品一厂提供。 1.2 试验动物 非免疫兔由黑龙江省试验动物室提供。 1.3 培养基 鲜血马丁琼脂、马丁肉汤。 1.3.1 鲜血马丁琼脂培养基配方及制法 牛肉汤500ml猪胃消化液500ml氯化钠2.5g琼脂粉12g将上成分混合,加热溶解，待琼脂完全溶化后,加氢氧化钠溶液调整PH为7.4-7.6以卵白澄清法或凝固沉淀法除去沉淀，分装于试管或中性玻璃瓶中, 116℃灭菌3040min。灭菌后PH值应为7.2-7.6。 根据需求在上述琼脂液冷却至53-55℃时,加入4%健康动物血清0.1%裂解血球全血,充分混合后,分装于灭菌平板或试管中,制成含4%健康动物血清和0.1%裂解血的鲜血马丁琼脂。 1.3.2 马丁肉汤培养基的配方及制法 牛肉汤500ml猪胃消化液500ml氯化钠2.5g将上列成分混合后，以氢氧化钠溶液调整pH为7.6-7.8,煮沸