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农药残留快速测实验方案 （DY-1000多通道农药残留快速测试仪） 一、相关概念 农药残留是指农药在使用后的一个时期内，残留于植物表面、泥土以及水中的微量农药、有毒农药分解物和杂质的总称。 在蔬菜生产中，经常使用的是有机磷类和氨基甲酸酯类这两大类农药。 二、检测原理 农药残留快速检测是依据酶抑制率法原理，即被测样品如含有机磷或氨基甲酸酯类农药时，将会抑制胆碱酯酶的活性，影响显色体系的反应速度；通过测定显色体系吸光度随时间的变化率，即可测量出待测样品中的农药残留量，结果以抑制率表示。 三、执行标准 DY-1000多通道农药残留快速检测仪是根据国家标准（GB/T5009.199—2003）和农业标准方法（NY/T 448-2001）中的酶抑制率法，结合快速检测方法研制的全新食品安全检测设备，能准确、快速检测出蔬菜、水果中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量。 四、仪器常规操作 1、对照测试: (a)调零：对照液放入检测室前应按“调零”键使透光度为100.0或吸光度为0.000。 (b)放置对照：将对照样放置在A1通道。 (c)测试：按“对照”键后，仪器即开始测试。测试完毕，显示屏显示吸光度变化值（酶试剂活性）。注：吸光度变化值必△A须大于0.1。 (d)按“返回”键返回待测界面。 2、样品测试: (a)调零：待测液放入检测室前应按“调零”键使透光度为100.0或吸光度为0.000。 (b)放置样品：在任意通道放置待测样液。 (c)测试：按“样品”键后，仪器开始测试。测试完毕，显示屏显示吸光度变化值△A及抑制率A%。 (d)按“返回”键返回待测界面。 五、实验操作步骤 第一步：试剂的配制 缓冲液：缓冲液粉剂+500ml蒸馏水至烧杯中,室温保存。 底 物：12.5ml蒸馏水+底物，0～5℃保存。 显色剂：25ml缓冲液+显色剂，0～5℃保存。 酶：直接使用，0～5℃保存。 第二步：样品提取 取果蔬代表性部位→称取2克→放入三角瓶中→加入10ml缓冲液→震荡40至50次→过滤，清液待用（样品液） 第三步：对照测试 取一比色皿加入2.5ml缓冲液→加入100μl酶试剂→加入100μl显色剂→加入100μl底物（一旦加入底物需立即混匀）→放入比色池，按“对照”键→等待检测结果→按“返回”键返回待测状态。 第四步：样品测试 取一比色皿加入2.5ml样品液→加入100μl酶试剂→加入100μl显色剂（混匀）→静置十分钟→加入100μl底物（一旦加入底物需立即混匀）→放入比色池，按“样品”键→等待检测结果→按“返回”键返回待测状态。 第五步：结果判定 1、合格：抑制率≤40％ 2、超标：抑制率≥50％ 3、可疑：40％＜抑制率＜50％(重复检测) 六、注意事项 1、做对照测试时，比色皿一定要放在A1通道；做样品测试时，比色皿可放任意通道。 2、做对照或样品测试时，如果透光度不为100%或吸光度不为0，必须先按“调零”键调零后才能将比色皿放入比色皿池中。 3、做完对照或样品测试后，比色皿应及时取出，按“返回”键返回待测界面。 4、酶试剂、显色剂、底物，应在0-5℃环境下保存，使用时必须先恢复到室温才能使用。 5、作对照测试时，吸光度变化值必须大于0.1才能进行样品测试。 6、加入底物后，试剂会迅速发生显色反应，所以在加入底物后，应迅速将比色皿放入比色池中进行检测。 7、葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄的汁液中，含有对酶有影响的次生物质，易产生假阳性，可采用整株提取法或表面测定法。 1