马铃薯病毒RT—PCR检测体系的建立.docVIP

马铃薯病毒RT—PCR检测体系的建立 　　摘要 依据马铃薯病毒PVS、PVX、PLRV、PVA的CP保守序列设计特异性引物，从马铃薯病叶组织中提取出病毒总RNA，进行cDNA 合成和PCR扩增，得到了与预期片段长度一致的PCR 特异扩增产物，建立了能够同步检测PVS、PVX、PLRV、PVA的RT-PCR 多重检测体系。该方法对PVS、PVX、PLRV、PVA扩增出的靶带大小分别为435、625、222、300 bp，凝胶电泳易辨别区分。研究结果表明，该方法特异性好、灵敏度高、快速简便，为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段。 　　关键词 马铃薯病毒；RT-PCR；检测体系；建立 　　中图分类号 S435.32；S41-30 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2011）21-0015-03 　　Establishment of Potato Virus Detection by RT-PCR 　　CHEN Yang-ting SANG You-shun 　　（Chengdu Academy of Agricultural and Forestry Sciences，Chengdu Sichuan 611130） 　　Abstract Based on the nucleotide sequence of the coat protein（CP）gene of