小鼠精巢細胞减数分裂标本的制备与观察.docxVIP

细胞生物学实验 PAGE \* MERGEFORMAT 1 小鼠细胞分裂标本的制备与观察 实验目的 掌握小鼠精巢染色体标本制作法。 观察减数分裂过程中不同时期的染色体。 观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。 实验原理 减数分裂（Meiosis）是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式，DNA复制一次，而细胞连续分裂两次，形成单倍体的精子和卵子。减数分裂远比有丝分裂复杂，经两次细胞分裂，分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ，两次分裂间又一个较短的间期，这个间期DNA不复制。 雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞，由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长，形成初级精母细胞，初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞，次级精母细胞有丝分裂成精细胞，再经一系列变化成精子。 因此，通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打，可使官腔各种细胞游离出来，然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。 实验试剂及仪器 材料：成年雄性小白鼠 用品：注射器、平皿、尖头镊子、剪刀（普通剪刀、眼科小剪刀）、吸管、离心管、离心机、玻片等。 试剂：1、100mg/ml秋水仙素。 2?、2％柠檬酸钠溶液 3、 0.075M的KCI 4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸（应现配） 5、PH6.8，0.01M的PBS缓冲液 6、Gimesa原液 7、Gimesa工作液：1份Gi