浮游菌及表面菌检测详解.ppt

采样方法： 袋蠕动 超声洗脱 搅动(带或不带玻琅珠) 涡旋式混合 冲洗 搅切(碎解) 擦拭 一步到位型 接触板 、 琼脂覆盖 擦拭 含有可吸收取样材料的棉拭子通常被固定于杆或把手上。样品材料是不是可溶性的都行。 通常的使用方法是用缓冲液或液体培养基湿润棉拭，用棉拭擦拭界定好的取样表面。在有些情况下，可以先湿润样品表面，然后用干棉拭擦拭，这样可以提高回收效率。随后将棉拭放至缓冲溶液或液体培养基中，并搅动以从棉拭上取下微生物。另外，有时也可用可溶性棉拭，使棉拭溶解于缓冲液或液体培养基中。则用过滤、平板计数或其他方法分析所得到的悬液 擦拭 是 从不规则形状产品或相对难以接近的区域取样的有效方法，该方法对取样面积必须大时也有效 但 该 方 法因擦拭方式的不同而更易出错。而且，通过擦拭不太可能将样品上所有的微生物都收集到。有些微生物可能会被棉拭本身吸附，从而不会被测到。 棉 拭 中 不应有微生物杀灭剂或微生物抑制剂 在 生 物 负载估计过程中，洗脱液可用于从产品上取下微生物;传送培养基可用于将取下的微生物移去计数;稀释液可用于获得含有可计数微生物的悬液。 洗 脱 液 和稀释液的特性对所用方法的效率有显著影响。 在选择稀释液或洗提液时，应注意它们的成分(如组成、浓度、渗透性和pH) 这些成分不应使微生物增殖或失活 当 用 液 体从固体表面取下微生物时，可考虑使用表面活化剂。 洗脱液、稀释液和转送培养墓 洗脱液的稀释液示例 溶液 水中的浓度 应用 林格氏溶液 1/4强度 通用 蛋白胨水溶液 0.1%~1.0% 通用 缓冲的蛋白胨水溶液 0.067mol/L磷酸 0.43%氢氧化钠 0.1%蛋白胨 通用 磷酸盐缓冲盐水溶液 0.02mol/L磷酸 0.9%氢氧化钠 通用 氯化钠溶液 0.25%~0.9% 通用 Calgon林格氏溶液 1/4强度 溶解藻酸钙棉拭 硫代硫酸盐林格氏溶液 1/4强度 中和残留氯 水 稀释含水样品，计数前制备可溶材料的等渗压溶液 注：此表并不包括所有。表面活化剂，如聚山梨醇酯（吐温80）可以加入洗提液和稀释液中。根据具体的应用，通常使用的浓度在0.01%~0.1%之间。应使用适当浓度的表面活性剂，并加以特殊处理以防止泡沫形成。 阴性对照 生理盐水 生理盐水 擦拭采样 25cm2 10﹣1 10﹣2 10﹣3 30℃~35℃ 72±2小时 用灭过菌的镊子沾湿棉球 把棉球放入试管内，摇匀（洗脱） 1ml 1ml 备料单 镊子 1个 平皿 7套 棉球 2个 试管 4支 刻度吸管 1ml 2支 大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)15~20ml/皿X7 0.9％生理盐水 10ml/支 x4 浮游菌（Airborne Microbe） 讲解目录 工作流程 备料单 1 2 3 4 5 6 此处添加目录标题 7 菌落计数 洁净室污染源 浮游菌 表面菌 培养基成分 接受指令 结果观察、记录 填写记录 写报告 采样 菌落计数 恒温箱培养 制作平板 灭菌 备料 制定计划 查阅依据 工作流程 备料单 平皿 2套 消毒剂(75%酒精) 采样仪 棉花 镊子 大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)15~20ml/皿X2 污染物种类 通常所指的空气污染物主要有以下三类 悬浮在空气中的固态、液态微粒 霉菌、致病菌等悬浮在空气中的微生物； 各种对人体或生产过程有害的气体。 由于空气净化的目的与对象不同，净化的内容、方法和衡量标准也不同。以洁净室为对象的空气净化的目的，就是最大可能地把空气介质中的悬浮微粒除掉，对于生物洁净室，还要控制有生命微粒。 2.2 污染物传播途径 危害生产工艺的主要污染源主要有： ①人员；②送风；③机器及其他生产设备； ④原材料与经过加工的原材料；⑤包装材料； ⑥生产工艺用各种介质及洁净用化学品； ⑦服装与其他设备中的纺织物； ⑧办公设备与办公材料；⑨参观人员； ⑩维修人员，特别是那些来自洁净区外部的人员。 与产品接触的污染物有两种来源 生产工艺之内产生； 从外部环境传入生产环境之中。 污染源 洁净室污染源 新风带入的尘粒和微生物； 作业人员发尘和散菌； 建筑围护结构、设施的产尘； 设备及产品生产过程的产尘。 室内空气的主要污染物质 污染发生源 粒状污染物 有害气体 人体 粉尘、皮屑、污垢、细菌、纤维、化妆品 体臭、CO2、氨、水蒸气 吸烟 粉尘（焦油、尼古丁等）、二甲硝酸铵等 CO、CO2、NO、NO2、甲醛、丙烯醛、碳氢化合物 办公设备 纸张、家具的纤维肌尘粒 臭氧、氨、溶剂类（VOC） 机械运