生物實驗安全防護.ppt

生物實驗安全防護講習 銘傳大學 生物科技學系 張猷忠 生物實驗安全防護的原則 人身安全 保障操作者本身的安全 維護實驗室其他成員的安全 保障實驗室外其他第三者的安全 避免污染 避免造成實驗室內環境的污染 含儀器，如冰箱、離心機、微量分注器等 避免造成實驗室外環境的污染 如動物飼養場、河川、魚、土壤、植物或作物等 生物實驗室的危險來源 所操作的生物 如病毒、細菌、真菌、寄生蟲和實驗動物等 藥品和試劑 如酸、鹼、致癌物、放射性同位素、毒性物質、易燃物質和危險氣體等 儀器設備 高壓蒸氣滅菌鍋、離心機、紫外光觀察箱、高熱烘箱和電泳設備等 管理制度和人 實驗室感染實例 台灣(2003/12)、新加坡(2003/9)及中國(2004/7)都曾發生實驗室人員感染SARS事件 預防醫學研究所詹姓研究員是在卸下全身所有的隔離衣裝備後，才操作培養SARS病毒器皿消毒步驟，因突發狀況，且無安全防護裝備而感染 流感病毒(H2N2)的實驗室感染 新城雞病病毒(Newcastle disease virus)造成大學教師感染結膜炎 北部某公立大學研究生感染布氏桿菌(Brucella abortus) 細菌之實驗室感染實例 肉毒桿菌(Clostridium botulinum type A )、沙氏桿菌(Salmonella spp.) 實驗操作意外，造成南部某學校實驗室工作人員感染弓蟲 幾乎與隱胞子蟲(Cryptosporidium parvum)實驗有關工作者都會受到感染，尤其是以小牛下痢為卵囊來源時 證據顯示卵囊可能經由空氣傳染 實驗室感染實例 1979年，英國Birmingham大學的一起實驗室意外，造成天花病毒散播 感染了兩個人，其中一人死亡 實驗室負責人也因此自殺 中部某大學本月中旬(2006/9/17)發生實驗室博士班學生感染桿菌性痢疾(Shigella flexneri )事件，該校另一間實驗室前年也曾發生登革熱感染意外 實驗室被關閉 生物實驗室的安全隱憂 美聯社報導(2005/9/16)：三隻感染了黑死病細菌的老鼠大約在兩週前從一個實驗室裏不見了 操作或保存中的微生物外洩： 引發動物或人類疾病 天花病毒(Small pox virus)、炭疽桿菌(Bacillus anthrax)、口蹄疫病毒(FMD virus)、肺結核桿菌(Mycobacterium tuberculosis) 與外界病毒產生核酸重組 流感病毒(Influenza virus)、輪狀病毒(Rotavirus)、Norovirus 與外界細菌交換遺傳物質 抗藥性或毒素基因 生物實驗室的安全隱憂 實驗室操作的核酸外洩： 抗除草劑基因、抗殺蟲劑基因 仍在實驗中的轉基因作物或轉基因動物 如何防範被感染人員散播病原 台灣預研所SARS事件，當事人發燒後6天，始自行至診所、醫院看病，並曾到新加坡開會，因此有70位新加坡人須被隔離，有20多名國人需作自我健康管理 基因重組實驗之安全 國科會頒有基因重組實驗室守則 同時考慮重組體及生物性安全防護 國內持有、保存或使用第二級以上感染性生物材料單位，為落實實驗室生物安全自主管理，避免發生實驗室感染意外，應依法成立生物實驗安全委員會或指派專責人員， 確實督導實驗室各項生物安全相關事項之執行，並依相關核備程序向該局申報。否則依傳染病防治法第63條規定，可處以新台幣9萬元至45萬元之罰鍰。 生物實驗審查程序 屬於事先必需經由研究機構生物實驗安全委員會批准之實驗 所有使用屬於第二級、第三級、及第四級危險群微生物為宿主之實驗 將第二級、第三級及第四級危險群微生物DNA殖入非病原性原核細胞或低等真核細胞之實驗 在組織培養或細胞培養系統中，培養具有感染性之動植物病毒類實驗，或在輔助病毒的存在下，培養有缺陷之病毒類實驗，涉及數種同科之病毒、病毒突變株、或選殖DNA片段時，因可能產生重組或互補，故所有外源性之病毒均應視為一種病毒 人體除外之動物及植物實驗 體積超過20公升以上之醱酵實驗 需經由行政院所屬主管機構核准後方可進行之實驗 選殖產生劇毒之基因(LD50小於100 ng/kg) 選殖LD50不明之毒素基因 將抗藥性基因殖入病原微生物，而有可能導致疾病防治困難的實驗 將基因重組後之DNA，或其產生之任何物質送入人體中 「基因轉殖植物田間試驗管理規範」所規範之實驗 「遺傳工程環境用藥微生物製劑開發試驗管理辦法」所規範之實驗 基因重組實驗的防護 物理性防護層級(Physical Containment Level) 物理性防護的目的是將重組體隔離在設施或設備內，防止實驗人員和其他物品受到污染，並且防止其向外界擴散 因封閉程度的不同，區分為P1、P2、P3和P4四等級 20公升以上大量培養實驗的物理性防護，區分為LS-C、LS-1及LS-2的三等級 生