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鉴别 常用鉴定试剂的配制和应用2010-06-08 12:55:40 阅读21 评论0 字号：大中小 （一）通用试剂 1．碘试剂 检查一般有机化合物。 （1）碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。 （2）0.5％碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。 2．硫酸试剂 检查一般有机化合物。 5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。 3．重铬酸钾-硫酸试剂 检查一般有机化合物。 5 g重铬酸钾溶于100 ml 40％硫酸中。喷该试剂后，150℃加热至斑点出现（不同化合物呈不同颜色）。 4．磷钼酸试剂 检查还原性成分。 5％磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。 5．磷钨酸试剂 检查还原性成分。 20％磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热，还原性物质呈蓝色斑点。 6．中性高锰酸钾试剂 检查易还原性成分。 0.05％高锰酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。 7．碱性高锰酸钾试剂 检查还原性成分。 溶液I： 1％高锰酸钾溶液。 溶液II：5％碳酸钠溶液。溶液I和II等量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄色斑点。 （二）苷类鉴定试剂 1．糖鉴定试剂 （1）α-萘酚-硫酸试剂 检查还原糖。 溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。 溶液II：硫酸。 （2）斐林试剂 检查还原糖。 溶液I：6.93 g结晶硫酸铜溶于100 ml水中。 溶液II：34.6 g酒石酸钾钠、10 g氢氧化钠溶于100 ml水中。 用时将配制的溶液1、II等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。 （3）茴香醛－硫酸试剂 检查糖类化合物。 硫酸1 ml加到含茴香醛0.5 ml的乙酸溶液50 ml，中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105℃加热至显示色斑，不同糖显不同颜色。 （4）苯胺-邻苯二甲酸试剂 检查糖类化合物。 苯胺0.93 g和邻苯二甲酸1.66 g溶于l00 ml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷后105℃加热5 min，显红棕色斑点。 （5）1,3-二羟基萘酚－磷酸试剂 检查酮糖、醛糖。 0.2％1,3-二羟基萘酚乙醇溶液50 ml与85％磷酸50 ml混合均匀后使用。喷后105℃加热5～10 min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色。 （6）苯胺－二苯胺－磷酸试剂 检查糖类化合物。 苯胺4 ml，二苯胺4 g及85％磷酸20 ml溶于丙酮200 ml中。喷洒于薄层板上，85℃加热10 min，不同糖显不同颜色。 （7）三氯化铁－冰醋酸（KK）试剂 检查α-去氧糖，常用于强心苷。 溶液I：1％三氯化铁溶液0.5 ml，加冰醋酸至100 ml。 溶液II：硫酸。 （8）Gregg-Gisvold试剂 检查2,6-去氧糖。 溶液I：10％三氯化铁溶液。 溶液II：1％盐酸甲醇溶液（97.2 ml甲醇中含2.8 ml盐酸）。 0.5 ml溶液I与100 ml溶液Ⅱ混合。将样品的乙醇溶液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110℃加热5 min，显蓝色为阳性反应。 （9）3,5－二氨基苯甲酸－磷酸试剂 检查2-去氧糖。 3,5－二氨基苯甲酸二盐酸盐1 g溶于80％磷酸25 ml，加水稀释至60 ml。喷洒后，100℃加热15 min，2－去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光。 2．酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂 检查酚类化合物、鞣质。 1～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。取l ml样品的乙醇溶液，加入试剂1～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或蓝色斑点为阳性反应。 （2）4－氨基安替匹林-铁氰化钾（Emerson）试剂 检查酚羟基对位无取代基的化合物。 溶液I：2％4－氨基安替匹林乙醇溶液。 溶液II：8％铁氰化钾溶液。作色谱显色剂用，先喷洒溶液I，再喷洒溶液II，用氨气熏，显橙红或深红色斑点为阳性反应。 （3）Gibbs试剂 检查酚羟基对位无取代基的化合物。 溶液I：0.5% 2,6－二溴（氯）苯醌氯亚胺的乙醇溶液。 溶液II：1％氢氧化钾乙醇溶液。取1 ml样品的乙醇溶液，滴加溶液II，使pH 9-10；再加入1～2滴溶液I，