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* 华南农业大学 食品学院 王丽 * 检样 稀释处理 BGLG肉汤 产气 大肠菌群阴性 不产气 接种LST肉汤管 不产气 产气 大肠菌群阳性 查MPN表 报告结果 * * 1:100 1:10 各加入1ml 各加入1ml 各加 入1ml LST发酵管 LST发酵管 LST发酵管 初发酵 检样稀释 检样量1g/ml 检样量0.1g/ml 检样量0.01g/ml 证实试验 BGLB发酵管 查MPN表报告结果 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * MPN法简介The Most Probable Number Method * * 1g/ml检样中最近似值(MPN)表 以1、0.1、0.01、各用3管。 阳性管数 MPN 个/100 g/ml 1g/ml×3 0.1g/ml×3 0.01g/ml×3 0 0 0 <30 0 0 1 30 0 0 2 60 0 0 3 90 0 1 0 30 0 1 1 60 0 1 2 90 0 1 3 120 0 2 0 60 0 2 1 90 0 2 2 120 0 2 3 150 0 3 0 90 0 3 1 130 0 3 2 160 0 3 3 190 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 六、大肠菌群快速检验 食品大肠菌群快速检验方法: TTC显色法 DC试管法 纸片法 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * (一)食品饮料大肠菌群快速检验纸片 ?????使用方法: 1.样品稀释同国标法 2.接种: 饮料和饮用水采用原液、1:10、 1:100三个稀释度,固体食品采用1:1 、1:10和1:100三个稀释度。用1亳升灭菌吸管吸取1亳升同一稀释度的稀释液均匀涂布到袋中的纸片上,做三个重复。 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 3.培养: 将接种好的纸片轻轻压平(可叠放),在36℃下培养15-24h观察结果。 4.结果判定: 纸片上出现紫红色斑点,其周围有黄圈者,为阳性. 纸片为一种着色,无菌落生长者为阴性. 纸片呈紫兰色,有紫红色斑点,其周围地黄圈者阴性. 酸性食品接种后,纸片变黄,经培养后无紫红色斑点为阴性 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * (二)餐具大肠菌群快速检验(纸片法) 使 用 方 法 : 1. 采样6—10份。 碗、盘、杯等每份贴纸片两张,用无菌生理盐水湿润纸片后,立即贴于食具内侧表面,30秒后取下,置于原塑料袋内。筷子以5只为一份样品,用吸管吸取生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约5cm)抹拭两张,放入原塑料袋内。 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 2.将已采样的纸样置于37°C培养15小时. 纸片在黄色背景上出现红色斑点为阳性,纸片在紫兰色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄晕均为大肠菌群阴性。同一份样品两张纸片均是阴性为合格。 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 食品冷饮大肠菌群检验纸片冷饮、乳制品和调味品等大肠菌群的测定 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 食品饮料大肠菌群快速检验纸片饮料、食用纯水和糕点的大肠菌群测定 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 餐具大肠菌快速检验纸片餐具卫生消毒效果检测 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * (三)petrifilm试纸片 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 实验安排: -食品中细菌总数及大肠菌群检验实验 9 月25 日下午 2:30 食品学院215 9 月 2 6 日下午 4:30 食品学院215 9 月 27 日下午 3:00 食品学院215 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * LST肉汤管 胰蛋白胨 氯化钠 乳糖 磷酸氢二钾 磷酸二氢钾 月桂基磺酸钠 蒸馏水 大肠菌群的产气量,多者可以使发酵倒管全部充满气体,少者可以产生比小米粒还小的气泡。如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时,可以用手轻轻打动试管。 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * BGLG肉汤 蛋白胨 乳糖 牛胆粉溶液 0.1%煌绿水溶液 蒸馏水 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 复习题 1、什么是大肠菌群?大肠菌群由哪些微生物组成? 2、测定食品、饮料等产品的大肠菌群数有什么意义? 3、大肠菌群具有哪些生物学特性? 4、在大肠菌群数的检验中,要注意哪些事项? * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 第四章 食品中细菌及其大肠菌群的检测 食品中细菌菌落总数的测定 食品中大肠菌群的测定 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 第一节食品中菌落总数的测定 * 华南农业大学 食品学院 王丽 * 一、菌落总数 GB/T 4789.2-2010:食品检样经过处理,在一定条件下培养后,所得每ml(或每g)检样中形成的微生物菌落总数。 本标准规定的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生
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