第8章 基因表达及其调控.ppt

第八章 基因表达及其调控 第八章 基因表达及其调控 导 言 基因表达(gene expression)： 储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。 实质上是指基因通过转录和翻译而产生其蛋白质产物，或转录后直接产生其RNA产物，如tRNA、rRNA等的过程。 基因型相同的细胞，为什么分化出不同的细胞和器官呢？ 各类细胞中均有相同的一些基因在表达，这些基因的功能对于每个细胞都是必须的，这些基因称为看家基因（house keeping）。 不同细胞类型存在特定基因表达，这些基因称为奢侈基因（luxury gene） 在一个组织中为丰富的mRNA，在另一个组织中就可能成为稀少mRNA而存在或不存在 第一节 大肠杆菌乳糖操纵子的正负调控 一、操纵子和操纵子模型 二、正调控和负调控 三、大肠杆菌乳糖操纵子的负调控 四、大肠杆菌乳糖操纵子的正调控 导 言 导言…… 乳糖代谢 大肠杆菌生长在无乳糖的培养基上时，每个细胞中含分解乳糖的酶，如β-半乳糖苷酶的分子还不到5个； 一旦加入乳糖后2-3分钟，每个细胞中的β-半乳糖苷酶的含量可增加上千倍，每个细胞约含该酶分子5000个； 而这时若将乳糖去掉，那么，2-3分钟后，细胞中的β-半乳糖苷酶的含量又恢复到初始水平。 导言…… 乳糖代谢 可见：乳糖能诱导相应的酶大量合成，因此，这种底物称为诱导物（inducer），相应的酶称为诱导酶（inducible enzyme）。 1961年，法国分子生物学家F.Jacob（杰柯伯）和J.Monod（莫诺）通过不同的大肠杆菌乳糖代谢突变体来研究基因的作用，从而提出操纵子学说（operon theory），1965年获诺贝尔奖。 一、操纵子和操纵子模型 概 念 1、操纵子（operon)： 很多功能上相关的结构基因串联排列在染色体上，由一个共同的控制区来操纵这些基因的表达，包含这些结构基因和控制区的整个核苷酸序列就称为操纵子。 2、操纵子的组成： 结构基因(structural gene, SG) ：操纵子中被调控的编码蛋白质的基因 启动子(promoter，P)：是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 操纵基因(operator，O)：是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列。 二、正调控和负调控 1、负调控（negative control） 无调节蛋白时，基因是表达的，加入调节蛋白，基因活性被关闭。 调节蛋白---阻遏蛋白（阻遏物） 特点： 一个阻遏蛋白或与DNA结合，阻止RNA聚合酶启动转录，或与mRNA结合阻止核糖体的启动与翻译。 二、正调控和负调控 …1、负调控 二、正调控和负调控 2、正调控（positive control） 无调节蛋白时，基因是关闭的，加入调节蛋白，基因活性被开启。 调节蛋白---无辅基诱导蛋白（apoinducer）  ---inducer activation 二、正调控和负调控……2、正调控 二、正调控和负调控 3、可诱导的操纵子（inducible） 在可诱导系统中，产生诱导作用的小分子称为诱导物(inducer)； 当诱导物活化了无辅基诱导蛋白或是钝化了阻遏蛋白，操纵子便处于可诱导状态； 二、正调控和负调控 4、可阻遏的操纵子（repressible） 在可阻遏系统中，产生阻遏作用的小分子物质则叫做辅阻遏物(corepressor)。 若是辅阻遏物钝化了无辅基诱导蛋白或是活化了无活性的阻遏蛋白，那么操纵子就会转入被阻遏的状态。 二、正调控和负调控 遗传学上利用调节蛋白基因的突变所产生的后果来区分正、负调控系统 无辅基诱导蛋白失活导致不可诱导状态或超阻遏状态，是正调控系统的特征； 阻遏蛋白失活产生的组成型(constitutive)表达则是负调控系统的特征。 三、大肠杆菌乳糖操纵子的负调控 1、大肠杆菌乳糖代谢的各种突变型 结构基因的突变 ： lac Z+ → lac Z－； lac Y+ → lac Y－； lac A+→ lac A－ 组成型突变体（constitutive mutant） 在没有诱导物的条件下lac ZYA都能表达 突变位点集中在 lacO 和 i 这两个基因位点上 F’因子 － 形成部分二倍体 三、大肠杆菌乳糖操纵子的负调控 2、非底物诱导物（gratuitous inducer） 既能诱导酶的产生而本身又不被分解 义务诱导物 用14C标记，检测与阻遏物的结合状态 三、大肠杆菌乳糖操纵子的负调控 3、阻遏物结构基因 i 的功能分析 i－突变体 在单倍体和部分二倍体中β-半乳糖苷酶、透性酶的合成 3、阻遏物结构基因 i 的功能分析 i－突变体 形成不正常的阻遏物．它