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2.非竞争性抑制(non-competitive inhibition) (1)含义和反应式 抑制剂I和底物S与酶E的结合完全互不相关，既不排斥，也不促进结合，抑制剂I可以和酶E结合生成EI，也可以和ES复合物结合生成ESI。底物S和酶E结合成ES后，仍可与I结合生成ESI，但一旦形成ESI复合物，再不能释放形成产物P。 抑制剂对酶活性的影响 抑制剂对酶活性的影响 某些化合物与酶分子中半胱氨酸残基上的-SH发生可逆的结合，酶活性受到抑制 （2）特点： ① I和S在结构上一般无相似之处，I常与酶分子上结合基团以外的化学基团结合，这种结合并不影响底物和酶的结合，增加底物浓度并不能减少I对酶的抑制。 ② 非竞争性抑制剂的双倒数曲线：有非竞争性抑制剂存在的曲线与无抑制剂的曲线相交于横坐标 -1/Km处，但纵坐标的截距，因竞争性抑制存在变大，说明该抑制作用，并不影响酶促反应的Km值，而使Vmax值变小，如下图所示： 抑制剂对酶活性的影响 非竞争性抑制 Vi＝ Vmax〔S〕 ( 1+ ) 〔I〕 Ki Km+ ( ) 〔S〕 1 Vi ＝ （1+ ） 〔I〕 Ki × （ ＋ ） 1 Vmax Km Vmax 1 〔S〕 抑制剂对酶活性的影响 3. 反竞争性抑制 (1)含义和反应式 反竞争性抑制剂必须在酶结合了底物之后才能与酶与底物的中间产物结合，该抑制剂与单独的酶不结合。 抑制剂对酶活性的影响 如叠氮化物对氧化型细胞色素氧化酶的作用 （2）特点： 反竞争性抑制剂存在下，Km、Vmax都变小。 1 Vi ＝ Km Vmax 1 〔S〕 + 1 Vmax 〔I〕 Ki (1+ ) Vi＝ Vmax〔S〕 〔S〕 〔I〕 Ki （1＋ ） Km＋ 抑制剂对酶活性的影响 酶的抑制剂在医药上有重大作用 ● 磺氨药 Sulfa drug (消炎片) Pseudo substrate 竞争性抑制剂 → 抑制叶酸的合成 ● 蛋白酶 抑制剂 Protease inhibitor 老年痴呆症 (Alzheimer‘s disease) 病变细胞的斑点 ● HIV protease 是 爱滋病毒 存活的重要酶 HIV protease (homodimer): ↑其 inhibitor 可治疗 AIDS 对称 不对称 → 类似 aspartyl protease: (monodimer) domain 1 Asp Asp domain 2 subunit 2 Asp subunit 1 Asp 爱滋病毒转译出來的蛋白质需经剪裁 gag pol env mRNA translation protein (gag-pol) HIV protease p17 p11 (protease) p15 p24 p32 (intergrase) p66/51 (reverse transcriptase) HIV protease vs Aspartyl protease 不对称单元体 ↓ HIV protease (homodimer) HIV Protease inhibitor 可治疗 AIDS 对称 二元体 Asp subunit 2 ↑Aspartyl protease (monomer) subunit 1 Asp domain 1 domain 2 Asp Asp 爱滋病毒存活需要 酸性蛋白酶 病毒蛋白酶活性 会受 抑制剂 干扰 人类也有类似的 酸性蛋白酶 设计 抑制剂 药物 只会攻击病毒 人体不会受害 设计专一性的抑制剂 分子对称的 HIV Protease 抑制剂 Drug design 药物设计 Combinatory Chemistry 组合化学 HIV Protease HIV Protease inhibitor * 六、pH值对酶反应速度的影响 七、温度对酶促反应速度的影响 八、酶浓度对反应速度的影响 九、激活剂对酶活性的影响 十、抑制剂对酶活性的影响 第四节 酶促反应动力学（二） 大多数酶的活性受 pH 影响显著，在某一 pH 下表现最大活力，高于或低于此pH，酶活力显著下降。酶表现最大活力的pH称为酶的最适pH(optimumpH pHm)。典型的酶速度-pH曲线是较窄的钟罩型曲线，但有的酶的速度-pH曲线并非一定呈钟罩型。如胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的速度-pH曲线。 胃蛋白酶的速度-温度曲线如下图： pH对酶促反应速度的影响 p379 胃蛋白酶和葡萄糖-6-磷酸酶的pH活性曲线 ： pH对酶促反应速度的影响 pH对