1代谢工程概论.ppt

* * * * * * * * * * * * * * 张星元：代谢工程导读 * 张星元：发酵原理（讲座） * 张星元：代谢工程导读 * 张星元：发酵原理（讲座） * 三、代谢工程的两个组成部分 1、“分析” 部分 2、“综合” 部分 代谢工程借助于 DNA重组技术而作为一种启用技术而出现； 把注意力放在这个领域的综合方面：新的基因在不同寄主中的表达，内酶的扩增，基因的删除，酶活力修饰，转录的解调或酶的解调等。 这样所谓的代谢工程，在相当程度上仅仅是应用分子生物学技术表现形式，几乎没有工程的内容，因此从生物过程的角度来衡量，并不是够格的代谢工程。  与所有传统的工程领域一样，代谢工程也包含 “ 分析 ” 和 “ 综合 ” 两个规定的步骤。 1、“分析” 部分 重要的工程内容存在于代谢工程的分析方面，例如： ①怎样推算特定代谢流量等生理状态参数？ ②怎样用这些信息解释代谢网络的控制结构（体系），进而提出达到某个目标的合乎道理的修饰位点？ ③怎样进一步估计测定这些遗传修饰和酶的修饰的真实的生化效果，以便进行下一轮的途径修饰，直到达到目的？ ④能不能提出一个合理的方法以确定代谢修饰的最有希望的靶位？ ⑤ ？…… 2、“综合” 部分 综合部分包括以分子生物学方法进行的综合实验：设计育种方案的制定，新的基因的导入和在寄主细胞中的表达，内酶的扩增，基因的删除，酶活力修饰，转录的解调或酶的解调等。 在综合方面，代谢工程的另一个不同寻常的特征是代谢途径的“集成”，而往往不是单个反应的导入。 代谢工程研究的是整个代谢网络，涉及到途径分析和热动力学可能性，途径流量及其控制。 我们研究的出发点正在经历从单个酶反应向相互影响的生化反应体系转变。 代谢网络 通过对整个反应体系而不是一个个孤立的反应的考察就有可能获得关于代谢和细胞功能的更全面的认识，在这个的意义上 “ 代谢网络 ” 的观念是最为重要的。 代谢工程使用来自还原论者的大量的信息和研究技术，来进行设计和综合。而关于整个体系的运转状态的观察（工程数据采集），对于进一步的合理的分析来说，又是最好的指导。 代谢工程让人们把注意力转向代谢网络的整个体系而不是其组成部分。这个转向说明基因工程已在总结经验和教训中走向成熟。 代谢工程与发酵工程 代谢工程把发酵工程的两个关键的组成部分菌种和发酵工艺控制凝聚在一起，这正是发酵原理的基本立场。 在发酵工业的历史上菌种和发酵工艺控制的分开，促进了发酵生产的工业化，也束缚了高精度发酵工程的发展。代谢工程使发酵工程返朴归真，代谢工程是强化了生物学属性的广义的发酵工程。 发酵原理（工业发酵的生物学原理）是代谢控制发酵通向代谢工程的桥梁，是分子生物学技术在发酵工业上取得丰硕成果的向导，也是我国生物工程、发酵工程界后生超越前辈、领先世界的“内功”。 微生物发酵技术 微生物发酵已经有几千年的历史，早在2000年以前，人们就开始利用微生物进行白酒、黄酒、清酒的发酵，此时的发酵为天然发酵时代。 现代生物技术在化工、医药卫生、农林牧渔、轻工食品、能源和环境等领域都将发挥重要作用，可促进传统产业的改造和新型产业的形成，对人类社会产生深远影响。 发酵工程是生物技术的重要组成部分，是生物技术转化成产品的重要环节。 微生物发酵 20世纪40年代，随着抗生素青霉素的发酵生产的大规模进行，开始了现代发酵工业时代。 通过自然选择的方法，人们用10-6的突变几率来筛选所谓的高产菌株。 由于没有代谢控制发酵理论作为指导，直到20世纪60年代现代发酵工业仍处于盲目阶段。 代谢的调节 1957年，日本的木下等人开始了谷氨酸的发酵研究。随着各国对代谢发酵理论的深入研究，许多国家转向发酵菌株本身的研究，获得了许多的氨基酸高产菌株。 核酸类物质发酵生产菌也以代谢控制发酵理论为指导进行选育，并奋起直追成为后起之秀。 两者的研究进一步推动了抗生素发酵的研究与生产，发酵由野生型发酵向高度人为控制的发酵转移；由依赖于微生物分解代谢的发酵转向依赖于生物合成的发酵，即向代谢产物大量积累的方向转移。 技术的发展 将微生物遗传学理论与实践密切结合，研究目的产物的生物合成途径、遗传控制和代谢调节机制，然后进行定向选育。 随着生物化学、分子遗传学、分子生物学的进一步发展，代谢控制发酵作为一门新兴的学科蓬勃发展起来，并应用于生产和科研的实践。 代谢控制发酵 代谢控制发酵就是利用遗传学的方法或生物化学方法，人为地在DNA分子水平上改变和控制微生物的代谢，使目的产物大量的生成、积累的发酵。 代谢控制发酵的核心为：解除微生物代谢控制机制，打破微生物正常的代谢调节，人为地控制微生物的代谢。 代谢工程 随着代谢控制发酵理论的日臻完善，目前已发展出一个重要的