性病的实验室检验与质量控制_培训课件.ppt

淋 病 常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌 直接显微镜检查 原理：男性淋菌性尿道炎的分泌物中，多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。 直接显微镜检查的临床意义 男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染 不能用于疗后判愈 多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证 淋球菌培养 1．原理：淋球菌在适宜的培养基上可生长出特征性的菌落，根据菌落大小、形态、光泽、边缘、颜色等情况，可以作为淋球菌的鉴定依据之一。 2、方法特点： 敏感性 81~100%。 特异性 100% 淋球菌培养 培养条件 ： 35 ℃ ～36℃，含5%～10% CO2，湿润（70%湿度）的环境。 CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。使用烛缸时，应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。 培养时间：24~48小时 淋球菌的初步鉴定 初步鉴定淋球菌的依据 菌落特征 氧化酶试验 革兰染色 淋球菌培养的临床意义 生殖道沙眼衣原体感染 常用生殖道衣原体感染检测方法 抗原检测 酶联免疫吸附试验（ELISA） 免疫层析快速检测 核酸检测 酶联免疫吸附试验 原理：与衣原体特异性单克隆抗体形成抗原抗体复合物，通过酶联显色反应检测衣原体抗原。 方法特点 敏感性：79－97％ 特异性: 97－99％ 试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故 结果判读客观性强，适宜于大样本沙眼衣原体感染的检测。 在沙眼衣原体高流行率的人群临床和健康体检；低流行率（小于5%）的人群中应用时，结果解释应慎重。 酶联免疫吸附试验临床意义 抗原快速检测 原理：利用免疫层析法原理，采用胶体金标记的沙眼衣原体抗体滤纸条或卡，快速检测标本中的沙眼衣原体抗原。 方法特点 简易，方便，快速，尤其适用于基层单位 标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果 抗原快速检测临床意义 该方法主要适用于女性患者宫颈标本的检测，敏感性较低。 该法快速、简便，无需特殊仪器，因此，较适合基层实验室开展。 核酸扩增检测 原理：核酸扩增技术是通过扩增沙眼衣原体的多拷贝基因（如隐蔽性质粒、染色体和RNA）检测病原体。 方法： 包括聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、等温链置换扩增技术（SDA）、转录介导扩增技术（TMA）等。目前国内广泛使用的有实时荧光PCR。 核酸扩增检测临床意义 核酸扩增检测具有很高的敏感性和特异性，世界卫生组织已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的“金标准”。 核酸扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体的检测，也可用于男女性尿液标本的检测。 开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临床核酸检测技术资格证。 方法评价 核酸检测 是目前为止最好的检测方法－但存在检测敏感性 上的局限性 ELISA抗原检测 严格按操作说明进行操作－是非常好的检测方法高通量，自动化 快速抗原检测 操作时间短，单人份操作，但敏感性极低 性病实验室的质量控制 内部质量控制 外部质量控制 1. 有实验室负责人，实验人员分工明确 2. 实验室人员应该定期参加培训、进修或专业研讨会 3. 有实验室各项管理制度 4. 制定常规实验室标准操作程序（SOP） 性病实验室的质量管理 性病实验室的质量管理 1．仪器、设备 实验室所有使用仪器应有使用、保养及维修记录有温控的仪器需每天记录温度 2．培养基及试剂 ⑴ 严格按配方及技术要求配制培养基及试剂 ⑵ 对配制的培养基及试剂应有质检 ⑶ 购买的试剂盒应为经国家有关部门检验 合格的产品（附有关证明） ⑷ 所有培养基及试剂的保存都应符合要求 性病实验室质量管理 3．质控 （1）实验室开展室内质控，包括使用阳性 对照和阴性对照质控品 （2）外部质控:省临检中心的室间质评活动 4.记录（LIS、描述性文字记录） 作用：可查询、统计、上报、科研 * * 性病的实验室检验与质量控制 人民医院检验科 一、什么是性病 性病—— 是一组传染性疾病， 通过性接触而传播的疾病。 我国重点防治的八种性病 梅毒、梅毒螺旋体 淋病、淋球菌 软下疳、杜克雷嗜血杆菌 性病性淋巴肉芽肿、衣原体 生殖道沙眼衣原体感染、沙眼衣原体 尖锐湿疣、乳头瘤病毒 生殖器疱疹、生殖器疱疹病毒 艾滋病 、HIV病毒 性病实验室在性病疫情监测中的任务 疾病准确诊断 * 梅毒