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本科生毕业论文(设计) 文 本 格 式 二○○ 年 月 日 学科分类号 0818 本科生毕业论文（设计） 题目：产纤维素酶嗜热一氧化碳链霉菌菌株Str430的微波诱变 Microwave Mutagenesis of Cellulase-Producing Streptomyces thermocarboxydus Strain Str430 学生姓名：　　　 卢珊珊 学　　号：　 0712401040 系　　别：　　 生命科学系 专　　业：　 生物工程 指导教师：　 胡 兴 教授 胡朝暾 讲师 起止日期：　 2010.4－2011.5 2011年 5 月 2日 怀化学院本科毕业论文（设计）诚信声明 作者郑重声明：所呈交的本科毕业论文（设计），是在指导老师的指导下，独立进行研究所取得的成果，成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外，论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的成果。对论文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确的方式标明。本声明的法律结果由作者承担。 本科毕业论文（设计）作者签名： 年 月 日 目录 摘 要 Ⅰ 关键词 Ⅰ Abstract Ⅱ Key words Ⅱ 1 前言 2 1.1 研究背景 2 1.2 纤维素概述 3 1.2.1 纤维素的组成 3 1.2.2 纤维素的化学结构 4 1.3 纤维素酶概述 4 1.3.1 纤维素酶的结构 5 1.3.2 纤维素酶的合成机制 6 1.3.3 纤维素酶解机制 7 1.3.4 纤维素酶的活力测定 8 1.4 产酶菌株的诱变育种 8 1.4.1 诱变剂的种类 9 1.5 纤维素酶应用 9 1.6 展望 11 2 材料与方法 12 2.1 材料 12 2.1.1 菌种 12 2.1.2 实验药品 12 2.1.3 实验试剂 13 2.1.4 主要仪器 14 2.1.5 培养基 15 2.2 实验方法 15 2.2.1 葡萄糖标准曲线的制作 15 2.2.2 菌株活化 16 2.2.3 单孢子悬液的制备 16 2.2.4 微波诱变 17 2.2.5 粗酶液的制备 18 2.2.6 酶活力测定 19 2.2.7 突变株的遗传稳定性实验 22 3 实验结果与分析 22 3.1 葡萄糖标准曲线 22 3.2 微波诱变结果 23 3.2.1 微波辐射时间与死亡率关系曲线的绘制 23 3.2.2 刚果红染色观察 24 3.3 酶活力测定结果 29 3.3.1 Cx酶酶活力的测定结果 29 3.3.2 β-葡萄糖苷酶活力的测定结果 30 3.3.3 C1酶活力的测定 30 3.4 诱变效果的评价 31 3.5 遗传稳定性试验结果 33 4 结论与讨论 33 4.1 实验结论 33 4.2 实验讨论 34 参考文献 35 致 谢 38 产纤维素酶嗜热一氧化碳链霉菌菌株Str430的微波诱变 摘 要 本研究对产纤维素酶嗜热一氧化碳链霉菌菌株Str430进行了微波诱变。同时绘制致死率曲线，并确定最佳微波诱变时间150秒。采用刚果红染色固体平板进行初筛，获得透明圈较大、HC值（水解圈直径/菌落直径）较大的菌株12株。在此基础上，进行液体发酵培养，测定其CX酶、β-葡萄糖苷酶和C1酶酶活，最终得到1株酶活较高的菌株，命名为W150。其三种酶活分别为0.1349 U/ml、0.0559 U/ml、0.0348 U/ml，比对照组酶活（即初始酶活）CX酶活0.0832U/ml、β-葡萄糖苷酶活0.0480U/ml、C1酶活0.0272U/ml分别提高了1.62倍、1.16倍、1.28倍。且W150菌株经多次传代证明该菌株遗传性能稳定。 关键词 嗜热一氧化碳链霉菌；纤维素酶；微波诱变；酶活力；遗传性能 Microwave Mutagenesis of Cellulase-Producing Streptomyces thermocarboxydus Strain Str430 Abstract This paper studies the microwave mutagenesis of cellulase-producing Streptomyces thermocarboxydus strain Str430.The 12 strains which formed big transparent zones and had h