第03章酶(改).pptVIP

五、抑制剂可逆地或不可逆地降低酶促反应速率 酶的抑制剂(inhibitor) 酶的抑制区别于酶的变性： 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白 变性的物质称为酶的抑制剂。 抑制作用的类型 不可逆性抑制 (irreversible inhibition) 可逆性抑制 (reversible inhibition) 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) 根据抑制剂和酶结合的紧密程度不同，酶的抑制作用分为： 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 概念 举例 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。 （一）不可逆性抑制剂主要与酶共价结合 有机磷化合物 路易士气 失活的酶 羟基酶 失活的酶 酸 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 （二） 可逆性抑制作用 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 类型 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失。抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制作用的抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心 有些抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶－底物复合物的形成。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 定义 反应模式 + I EI E + S E + P ES I S + + + E S I ES EI P E E 特点 抑制程度取决于抑制剂与底物浓度的比值； I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 动力学特点： Vmax不变，Km增大 抑制剂↑ 无抑制剂 1/V 1/[S] 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 磺胺类药物的抑菌机制 ——与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶 二氢叶酸 二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率 （一）酶比一般催化剂更有效地降低反应活化能 酶和一般催化剂一样，加速反应的作用都是通过降低反应的活化能 实现的。 活化能：底物分子从初态转变到活化态所需的能量。 反应总能量改变 非催化反应活化能 酶促反应 活化能 一般催化剂催 化反应的活化能 能 量 反 应 过 程 底物 产物 酶促反应活化能的改变 （二）酶-底物复合物的形成有利于底物转变成过渡态 酶底物复合物 E + S E + P ES (过渡态) 诱导契合作用使酶与底物密切结合 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过程称为酶-底物结合的诱导契合。 酶的诱导契合动画 2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于酶的活性中心 这种邻近效应与定向排列实际上是将分子间的反应变成类似于分子内的反应，从而提高反应速率。 酶的活性中心多是酶分子内部的疏水“口袋”，酶反应在此疏水环境中进行，使底物分子去溶剂化 ，防止水化膜的形成，利于底物与酶分子的密切接触和结合。这种现象称为表面效应。 3.表面效应使底物分子去溶剂化 （三）酶的催化机制呈多元催化作用 1.一般酸-碱催化作用 2.共价催化作用 3.亲核催化作用 第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 酶促反应动力学：研究各种因素对酶促反应速率的影响，并加以定量的阐述。 影响因素包括：酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。 一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速率的影响呈矩形双曲线关系。 单底物、单产物反应； 酶促反应速率一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示； 反应速率取其初速率，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速率 底物浓度远远大于酶浓度。 研究前提： 产 物 0 时 间 初速度 酶促反应速度逐渐降低 酶促反应的时间进展曲线 b c a 矩形双曲线和米-氏方程的对应关系 Ｖ＝ Vmax[S] Km + [S] V与[S]成正比为一级反应 Ｖ Vmax Km ≈ [S] V不成正比例加速,介于a、c之间, 为混合级反应。 达Vmax,V不再增