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- 2016-12-18 发布于浙江
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Glucose Test 1、实验目的 2、原理 3、试剂 4、实验步骤 5、计算 6、结果分析 实验目的 掌握GOD-POD法测定血糖浓度的原理、方法及临床意义。 原 理 D-葡萄糖 + O2 + H2O H2O2 + D-葡萄糖酸 H2O2 + 4-AAP + 酚 2H2O + 红色醌类化合物 试剂盒组成 R1:酶试剂 1×100ml 葡萄糖氧化酶(GOD) ≥14U/ml 过氧化物酶(POD) ≥2U/ml 4-氨基安替比林 0.5mmol/L R2:酚试剂 1×100ml 酚 20mmol/L 葡萄糖校准液 5.5mmol/L 1×2ml 实验步骤 1.工作液配制: 根据测定所需试剂量,取R1和R2混合(按照试剂盒的要求),即为工作液 样 品 待测血浆: 抽血5ml,加抗凝剂肝素, 离心,3000转/分,5分钟 取上清液即为样品 离心机 (1)使用前应先检查调速旋钮是否在“O”处. (2)离心操作,都必须严格遵守平衡的要求:样品不超过离心管2/3体积;对称放置。 (3)盖严离心机盖 ; (4)开动时,先开电门,然后慢慢拨动变速旋钮,使速度逐渐增加,转速稳定后开始计时。 (5)停止时,先将旋钮逐步拨动到“O”,待自动停止后方可打开机盖。不继续使用时,拔下插头 注意事项 离心时,若听到特殊响声或有振动,可能是离心管破碎或不平衡,应立即关机,作相应处理。 严禁用手或其他物品迫使离心机停止。 离心时,人远离离心机。机盖上不可放任何物品。 分光光度计722S型 1、? 接通电源,预热30′,调波长 2、? 校准,打开盖为数显为0,关上为100 3、放入比色杯比色,手拿比色杯粗糙面 4、清洗比色皿,用滤纸或拭镜纸擦干 计 算 样品葡萄糖含量(mmol/L) = × Cs (Cs为5.55) As:标准液的吸光度 Au:待测液的吸光度 参考值范围:3.89-5.56mmol/L * * POD GOD (ml) 空白(B) 校准(S) 测定(U) 样品 —— —— 0.03 校准液 —— 0.03 —— 蒸馏水 0.03 —— —— 工作液 3.00 3.00 3.00 混匀,37℃恒温15分钟,505nm波长,以空白管调零,测定各管吸光度。 100% 0% FUNC MODE TRANS ABS FACT CONC 波长旋钮 Au As
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