Napsin A基因治疗肺纤维化的体外实验研究及作用机制探讨.docVIP

江苏大学 博士学位论文 Napsin A基因治疗肺纤维化的体外实验研究及作用机制探讨 姓名：管淑红 申请学位级别：博士 专业：临床检验诊断学 指导教师：郑金旭 201104  要 肺纤维化是间质性肺疾病的最终结局，目前尚无控制或逆转病情 的有效治疗方法，肺移植是唯一可以延长肺纤维化患者生存期的方法， 因其代价昂贵和供体稀缺，所以不能普遍开展。在现代分子生物学和 基因工程技术飞速发展的推动下，基因治疗肺纤维化有望成为一种突 破性的治疗手段。 ?????，??转变为成纤维细胞和成纤维 和后续增殖是治疗肺纤维化的两个有效靶点。 ??? 皮细胞中有明显表达。研究发现它除了具有蛋白水解酶活性外，还有 调节细胞多种生物学行为的功能。国内外学者研究发现细胞在表型发 生转化后，比如恶性转化，??? 化程度成正相关，提示??? 制，??? 胞表型转化和增殖能力的生物学功能研究其抗肺纤维化作用的价值。  江苏大学博士学位论文：??? ??逋馀嘌鳤??赴??鑄?一? 定模型。 ??菇ㄖ刈槁?《局柿???一?????訪?????? 液感染??细胞，用抗生素嘌呤霉素筛选出稳定的 ??细胞在???讨性鲋衬芰Φ挠跋欤?Ｐ凸菇ê笥肦?甈?和 ?訟??赴鸈?的干预作用。 ??? 率，瘤体?染色病理切片观察??细胞生长情况，体内研究??? ?甒???．??方法检测??细胞中整合素信号传导通路的基础 分子一黏着斑激酶??????????，??的表达，探讨??? ?稍???赴?鲋澈虴?的作用机制。 研究结果如下：  ??瓸?盏际鄙?に俾首畲螅?秆〕鯰?．??罴雅ǘ任? ?疞 ?盏己蟮?天完全演变为 间质细胞形态，确定第?煳DＰ屯瓿墒奔洌荒Ｐ凸菇ㄍ瓿珊螅琑?甈? 和????産??椒?觳獾较赴?泶顴钙蛋白明显下调，而纤维连接蛋 ??菇ㄖ刈槁?《局柿???．??? ???条带，大小约为?? 鉴定，均能扩增出??? 所含目的基因序列准确无误。?．??蚖???—??方法检测 质变、?频鞍妆泶锵碌髑魇啤⑾宋??拥鞍缀虸型胶原表达上调幅度 ?甒???．??方法检测到??细胞在体外肺纤维化模型中表达 ??蚝蟊泶颋?增加趋势变小。 由此得出以下结论： ?盏糀??赴?鲋澈虴?，成功构建了体外肺纤维化 模型。  ???寐?《驹靥宄晒?菇?薃??甈??．??? 且稳定持久表达??? ?梢圆糠忠种葡赴鸈?。 ?  ????????????． ? ? ???? ? ??? ????．??? ?????，?? ??????? ? ????? ????? ?? ??．????????? ???? ? ???? ?? ????? ?? ????，???? ?????? ??? ?????? ? ?? ? ?? ??? ????? ???? ????瓵???? ?? ??????????? ??????? ?? ????? ?? ??????瑆?? ????．?????????? ? ? ??? ??????????? ?? ???? ??? ?? ????．???? ????? ??? ??????? ?? ? ????? ?????．? ????? ??? ???????．? ??? ????，? ?? ???  。———————————————————●?——————?!!!!瘛!!!!!!馹?——????????●???????馹?———?????????———一 ?? ? ??????? ???? ????? ?? ??????? ?? ? ???? ???????????· ? ??? ?? ?? ??? ??? ??? ?????．???，? ??????? ????? ? ??????? ????? ? ??? ????? ???? ????? ?? ? ?? ???琾??? ??? ??????· ? ? ????? ??? ??? ? ??? ??? ?????? ???? ????? ?????? ???? ??? ???  ?? ???瑃????? ??? ?? ??? ??? ?? ??? ?????? ?甌? ?? ??? ???? ????? ??????瑃? ???? ?? ?? ? ? ????? ? ??? ?? ????? ????? ?? ?????，? ? ???? ????? ????? ????? ?? ? ? ??? ???? ?????．??????? ?????? ??? ? ??? ? ?? ??????? ???  ?? ???? ?? ?????? ??一?????? ?? ?? ???????? ?? ?? ?? ?????????? ????? ?? ??