化学发光与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的方法学比较分析.docVIP

化学发光与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的方法学比较分析 　　摘要：目的 比较ELISA法和化学发光法检测乙肝血清标志物的一致性和差异性。方法 分别采用ELISA方法和化学发光法检测患者血清进行乙肝血清学标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc），对检测结果进行χ2检验分析，比较此两种方法的一致性和差异性。结果 乙肝常见模式中，两种方法测定HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBcIgM结果符合率分别为92.31%、92.31%、95.38%、、92.31%，无统计学差异，抗-HBe符合率为81.54%，在两种检测方法有统计学差异（P1000IU/L的5例标本用ELISA法测得全部阴性。用化学发光法测得单独抗-HBs10IU/L且1000IU/L的6例标本用ELISA法测得全部阴性。用ELISA法测得单独HBeAg阳性且经DNA扩增小于500拷贝的4例标本用化学发光法测得全部为阴性。结论 乙肝普通模式中HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBcIgM用ELISA法和化学发光法一致性较好，用化学发光法检测抗-HBe更准确，更灵敏；乙肝少见模式的检测中ELISA法的灵敏度仍不够高，可导致某几项血清标志物的错报和漏报；不同目的的检测可以选用不同的方法：ELISA法可用于健康体检，术前肝炎病毒筛查等；化学发光法可用于肝炎患者的疾病监测、指导用药、疗效观察及判断预后等方面。 　　关键词：乙型肝炎病毒；血清标志物；ELISA；化学发光法 　　病毒性肝炎中乙型肝炎的危害较大，我国又为乙肝的高发区，约占世界HBV感染者的一半。乙肝病毒的病原体不仅具有传染性，还可能导致发展成肝硬化，甚至肝癌，所以HBV标记物的早期、准确、定量检测对乙肝临床诊断、疗效观察及预防具有重要意义。目前国内检测HBV-M使用较多的仍是占主导地位的ELISA法。随着化学发光技术的发展，其在免疫学检验方面的应用日益受到人们的重视。化学发光法检测乙肝病毒血清标志物具有高灵敏度、宽线性、反应快，影响因素少，结果准确等优点。因此，化学发光法更适用于需要进行定量、半定量检测的临床患者标本，显示出很好的应用前景。 　　化学发光法检测肝炎标志物与ELISA法有何差异尚无明确的结论。本研究分别用化学发光和ELISA法检测乙型肝炎的血清学标志物，比较分析两种方法测试结果的一致性和差异性，为乙型肝炎的筛查、临床诊断、指导用药及其判断预后等不同目的的检测选择一种更为快速、准确且节约的方法。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 选择2013年10月～2014年3月就诊的HBV感染者96例，其中男52例，女44例；年龄23岁～76岁，平均47岁。其中单独HBsAg阳性5例，单独抗-HBe阳性11例，单独抗-HBs1000IU/L的5例，单独抗-HBs10IU/L但1000IU/L6例，单独HBeAg阳性且DNA扩增500拷贝4例。 　　1.2仪器与试剂 　　1.2.1仪器美国雅培全自动酶免分析仪ARCHITECT-i2000。 　　1.2.2试剂上海科华生物技术有限公司肝炎标志物ELISA试剂盒；ARCHITECT-i2000 SR乙肝标志物配套试剂。 　　1.3乙肝病毒血清标志物的检测 　　1.3.1 ELISA法所用试剂由上海科华生物技术有限公司提供，于有效期内使用，操作和结果判断严格按试剂要求进行，并记录结果。 　　1.3.2化学发光法将所收集到的血清用美国雅培全自动酶免分析仪ARCHITECT-i2000进行检测，乙肝六项标志物的定值质控血清购自雅培公司，操作和结果判断严格按试剂要求进行并记录结果。 　　1.4统计学分析用SPSS16.0统计分析软件对化学发光法与ELISA法的检测结果进行χ2检验，以P0.05为有统计学差异。 　　2结果 　　2.1乙肝结果比较乙肝两种方法测定HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBcIgM结果符合率分别为92.31%、92.31%、95.38%、81.54%、92.31%。经配对χ2检验HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBcIgM两种检测方法结果差异无统计学意义（P0.05）。抗-HBe两种检测方法结果差异有统计学差异（P0.05）。（见表1）。 　　注：*表示两组间比较有统计学差异，P0.05。 　　3讨论 　　常规的乙型肝炎病毒免疫标志物的血清学检查为五项即：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc，是临床诊断、治疗、分析和判断HBV感染者病程及传染性的重要依据。HBV标记物的早期、准确、定量检测对乙肝临床诊断、疗效观察及预防具有重要的意义。HBV-M的变化是评估乙型肝炎感染后病情转归的重要依据，也是抗病毒治疗的疗效监测指标