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流式细胞术检测血小板相关抗体的研究 　　【摘要】目的：探讨流式细胞术在检测血小板相关抗体中的意义及其在特发性血小板减少性紫癜诊断中的价值。方法：选取在2010年5月到2013年5月来我院接受治疗的100例特发性血小板减少性紫癜患者，随机分成两组，对照组和观察组，每组各50人，采用流式细胞仪检测观察组患者的血小板相关抗体，对照组患者采用传统方法检测血小板相关抗体，记录并比较两组患者的检测结果。结果：采用流式细胞仪检测后，观察组患者的IgG阳性率为86%；采用传统方法检测后，对照组患者的IgG阳性率为72%，观察组患者的IgG阳性率明显高于对照组患者，两组患者在IgG阳性率上的差异有统计学意义；对观察组患者经激素治疗后平均荧光强度较治疗前降低，流式细胞仪对检测患者的治疗效果有明显作用。结论：流失细胞术在检测ITP患者血小板相关抗体中较传统方法具有简单、灵敏度高等优点，可用于临床上ITP的疗效评估，对ITP的诊断有重要价值。 　　【关键词】流式细胞术，血小板，特发性血小板减少性紫癜，IgG，阳性 　　有研究发现血小板相关抗体的检测在ITP的诊断和治疗中有重要价值，但是传统的检测方法会增加患者的不适和痛苦、不利于患者的治疗、采血量较多、家属和患者难以接受等，更重要的是传统方法是导致医疗纠纷的主要原因【1】。所以，寻找新的检测方法，提高ITP患者的血小板相关抗体检出率，对ITP患者的康复和减少医疗纠纷有重要作用。流式细胞仪对血小板相关抗体的检测具有简单、重复性高、结果准确、采血量少等优点，随着对其研究的深入，发现流式细胞仪对临床治疗ITP的疗效判定有一定的意义【2】，在临床检测当中，应用的范围越来越广。本文就流式细胞仪在检测ITP患者血小板相关抗体中的意义作进一步探讨，其探讨结果如下： 　　1一般资料和方法 　　1.1一般资料 选取在2010年5月到2013年5月，来我院接受治疗的100名特发性血小板减少性紫癜患者，随机分成两组，对照组和观察组，每组各50人。观察组患者中男28人，女22人，年龄在21到60岁之间，平均年龄为41.3岁；对照组患者中男29人，女21人，年龄在23到59岁之间，平均年龄为38.9岁。所有患者经详细询问病史、系统的体格检查和实验室检查后确诊为特发性血小板减少性紫癜。两组患者在性别、年龄、病程及病情等一般资料上的差异没有统计学意义即p0.05。 　　1.2方法 首先进行采血及血浆分离，经肘静脉采血后，加入EDTA-Na?2抗凝，然后离心10min，离心速度为1000转每分钟，用TEN洗涤分离出上层血浆，再对余血离心10min，离心速度为2500转每分钟，去上清，重复操作3次，分离出血浆；然后对以上标本进行检测，对照组患者采用ELISA检测，将洗涤后血小板的浓度调整为100×109/L，加入Triton悬液，4℃下破碎离心，用人IgG包被，封闭后加入人IgG标准液或者血小板破碎液，再加入羊抗人IgG稀释液，培育后显色，测定OD490吸光度值。观察组患者采用流式细胞仪检测IgG，首先将血小板进行标记，将羊抗鼠抗体或者羊抗人抗体与血小板悬液混合，洗涤两次，孵育25分钟后，进行检测，然后进行流式分析，调整激光器的波长为488nm，调整仪器处于正常状态，采用荧光强度道数对血小板表面的IgG含量进行测定。 　　统计学分析，采用SPSS13.0统计学软件对检测结果进行分析，分析结果如下： 　　2结果 　　对经流式细胞仪和ELISA法检测特发性血小板减少性紫癜患者的IgG结果进行比较，其结果如下： 　　表1经流式细胞仪和ELISA检测两组患者的IgG结果比较 　　分组 人数 IgG平均含量 阳性人数 阳性率 　　观察组 50 191±78b 43 86% 　　对照组 50 28±21 36 72% 　　从以上结果可以看出，观察组患者的IgG阳性率明显高于对照组患者，两组患者在IgG阳性率上的差异有统计学意义即，P0.05。 　　对观察组患者经激素治疗后，经流式细胞仪检测其治疗前后的IgG平均荧光强度结果如下： 　　表2经激素治疗前后的IgG平均荧光强度比较 　　患者 荧光强度 　　治疗前 治疗后 　　1到10名 81.32 49.20 　　11到20名 121.15 51.38 　　21到30名 69.39 31.41 　　31到40名 92.13 44.30 　　41到50名 86.36 50.12 　　从以上结果可以看出，流式细胞仪检测ITP患者的IgG灵敏度较高，对患者的治疗效果有一定的评估作用。 　　3讨论： 　　诊断血小板相关疾病的关键是，检测出血小板生存时间和血小板相关抗体【3】，流式细胞仪在判定血小板功能、对出血性疾病的诊断、诊断血栓性疾病和检测血小板相