DNA的生物合成和损伤修复课件.ppt

H2鞭毛素 阻遏蛋白 Hin重组酶 转位片段 hin H2 I H1 H1鞭毛素 hin H2 I DNA 启动序列 H1 启动序列 沙门氏菌H片段倒位决定鞭毛相转变 （三）免疫球蛋白基因的重排 免疫球蛋白(Ig)，由两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成，分别由三个独立的基因族编码，其中两个编码轻链(?和?)，一个编码重链。 轻链的基因片段： 重链的基因片段： L V J C L V D J C 重链(IgH)基因的V-D-J重排和轻链(IgL)基因的V-J重排均发生在特异位点上。在V片段的下游，J片段的上游以及D片段的两侧均存在保守的重组信号序列(recombination signal sequence, RSS)。此重排的重组酶基因rag (recombination activating gene)共有两个，分别产生蛋白质RAG1和RAG2。 CACAGTG(12/23)ACAAAAACC GTGTCCAC TGTTTTTGG 重组信号序列 基因片段 V片段 J片段 RSS RSS 间插DNA OH OH V J 单链切开 RAG1 RAG2 分子内转酯反应 单链切开 转移核苷酸 修复、连接 免疫球蛋白基因重排过程 三、转座重组是插入序列和转座子介导的DNA移位 大多数基因在基因组内的位置是固定的，但有些基因可以从一个位置移动到另一位置。这些可移动的DNA序列包括插入序列和转座子（transposon, Tn）。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)，又称转座重组(transpositional recombination)。 插入序列(insertion sequences, IS)组成： 二个分离的反向重复(inverted repeats, IR)序列 特有的正向重复序列 一个转座酶（transposase)编码基因 IR Transposase Gene IR 发生形式： 保守性转座(conservative transposition) 复制性转座(duplicative transposition) （一）插入序列转座 插入序列的复制性转座 转座子(transposons) ——可从一个染色体位点转移到另一位点的分散重复序列。 转座子组成： 反向重复序列 转座酶编码基因 抗生素抗性等有用的基因 IR IR Transposase Gene 有用基因 （二）转座子转座 由转座子介导的转座 * * * 修复对象：将DNA中因紫外线照射而形成的嘧啶二聚体分解。 机制：细胞内光裂合酶（photolyases）分子中生色基团次甲四氢叶酸吸收光子并将FADH2激活生成的激发型FADH2，再将电子转移给嘧啶二聚体，使其还原。 分布：分布广泛，除哺乳动物外均有之。 （一）直接修复（direct repair）利用修复酶简单地逆转DNA损伤 光复活修复系统 修复对象：DNA中被甲基化修饰的鸟嘌呤（O6-甲基鸟嘌呤，与T配对）。 机制：将甲基转移到酶蛋白活性中心的Cys残基侧链上，使鸟嘌呤复原，避免发生突变。 特点：DNA甲基转移酶一旦接受甲基就不再具有催化活性 ，修复代价高昂 。 O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶修复 糖苷酶（glycosylases）识别、切除受损碱基，产生AP位点（apurinic or apyrimidinic site）。 AP内切酶在AP位点的5’端切断磷酸二酯键。 AP外切酶再切割AP位点的3’端。 DNA聚合酶填补产生的缺口。 最后DNA连接酶连接。 （二）碱基切除系统修复切除受损碱基 碱基切除修复（base excision repair, BER） 对象：受损的碱基 修复系统： E.coli碱基切除修复系统 切除胞嘧啶自发脱氨基产生的尿嘧啶 胞嘧啶脱氨基产生的尿嘧啶； 氧化的鸟嘌呤（oxoG）； 脱氨基的腺嘌呤； 开环碱基； 碳原子之间双键变成单键的碱基等。 DNA糖苷酶识别的异常碱基包括： 功能：利用DNA糖苷酶切除DNA复制前未去除的损伤碱基。 自动防故障（fail-safe）系统 碱基切除修复系统切除鸟嘌呤氧化产物oxoG DNA聚合酶和连接酶以未损伤的DNA链为模板修补缺口。 （三）核苷酸切除修复系