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- 2016-12-22 发布于浙江
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模块二 实验三 细菌的荚膜染色 一 实验目的 学习细菌的荚膜染色法。 二 实验原理 由于荚膜与染料间的亲和力弱,不易着色,通常采用负染色法染荚膜,即设法使菌体和背景着色而荚膜不着色,从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量在90%以上,故染色时一般不加热固定。以免荚膜皱缩变形。 荚膜(肺炎球菌) 三 实验器材 1 菌种:培养3天的褐球固氮菌,该菌在阿须贝培养基上生长时,产生丰厚的荚膜。 2 染色液和试剂:用滤纸过滤后的绘图墨水或黑色素溶液、番红染色液、纯甲醇、香柏油、显微镜擦拭液。 3 器材:载玻片、试管夹、擦镜纸、显微镜等。 四 实验方法 1 制菌液:加1滴墨水于洁净的载玻片上,挑少量菌体与其充分混合均匀。 2 推片:取一清洁载玻片一端接触混合液,以30°角进行推片。 3 晾干:在空气中自然晾干。 4 固定:滴一滴纯甲醇于晾干的墨水上,固定1min。 5 染色:用番红染液染色1-2min。 6 水洗:用自来水冲洗至流水无色。 7 干燥:自然晾干。 8 镜检:先用低倍镜、再用高倍镜、油镜观察。 9 结果:背景黑色,菌体红色,在其周围呈现一明亮的透明圈即为荚膜。 五 实验报告 绘出褐球固氮菌的菌体和荚膜的形状。 * *
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