核酸探针标记课件.pptVIP

第9章 核酸探针标记（label of nuclei acid probe ） 山东大学医学院免疫学研究所 张利宁 一、探针的类型 核酸分子探针是指用放射性核素或其他标记物标记的、能与特定的靶分子发生特异性相互作用的DNA或RNA片段。 1． 基因组DNA探针：病毒DNA等 2． cDNA探针；最常用 3． 寡核苷酸探针：10-50bp，测序、点突变 4． RNA探针：稳定性高、特异性强，但RNA极易降解，不宜操作。 二、探针的标记物 理想的标记物：敏感度高；特异性强；不影响探针分子的主要理化特性；标记、检测方法简单、探针保存时间长；对环境无污染、对人体无损害；价格低廉。 一）放射性标记物 二）非放射性标记物 （一）? 放射性标记物 ----放射性核素 利用放射性核素能产生射线的特性将核素标记在核酸合成所必需的NTP或dNTP上，通过一定方法掺入到DNA 或RNA 中去制成探针，与待测的核酸杂交后，核素产生的?或?射线可使底片感光的特性，通过放射自显影的方法进行检测。 产生?射线的核素：32P、3H、35S 产生?射线的核素：125I 1、常用的放射性核素 1）?32P：产生?射线，灵敏度高，分辨率强，是最常用的放射性标记物，但半衰期短（14。3天