MMP―2、MMP―9及TIMP―2、TIMP―1在非黑色素性皮肤癌中的表达.docVIP

MMP―2、MMP―9及TIMP―2、TIMP―1在非黑色素性皮肤癌中的表达 　　[摘要] 目的 探讨金属基质蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮肤癌中的表达。 方法 取皮肤癌手术切除标本40份，进行免疫组化检测MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1的表达。 结果 MMP-2、MMP-9在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著高于正常皮肤。TIMP-2、TIMP-1在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著低于正常皮肤。 结论 基质金属蛋白酶（MMP）在非黑色素性皮肤癌中呈高表达，基质金属蛋白酶组织抑制因子呈低表达，两者比例失衡与皮肤癌的浸润和转移有关。 　　[关键词] 皮肤癌；MMP-2；MMP-9；TIMP-2；TIMP-1 　　[中图分类号] R739.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）11-0103-03 　　非黑色素性皮肤癌主要包括基底细胞癌（BCC）和鳞状细胞癌（SCC），是临床常见的皮肤癌，约占所有皮肤癌的90%。在美国，每年患非黑色素皮肤癌的人口约100万，其中基底细胞癌占70%-80%，鳞状细胞癌约占20%。随着我国人口平均寿命的延长，皮肤癌发病率也在逐渐升高。在我国以鳞状细胞癌为主。肿瘤的侵袭和转移是预后不良的主要原因。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥重要的作用，而基质金属蛋白酶水解酶组织抑制因子可抑制基质金属蛋白酶的活性[1]。有大量的研究证实，MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1在多种恶性肿瘤中有表达。本文主要探讨其在非黑色素皮肤癌中的表达。 　　1 材料与方法 　　1.1 研究材料 　　选择2010～2012年在我院手术切除治疗的非黑色素皮肤癌患者40例。其中鳞状细胞癌（SCC）25例，为SCC组，男14例，女11例，年龄35～68岁，平均（56.7±21.3）岁。其中头颈部10例，外生殖器7例，四肢5例，躯干3例；高分化18例，中分化7例。基底细胞癌（BCC）15例，男9例，女6例，年龄37～70岁，平均（57.9±19.8）岁。其中头颈部7例，外生殖器4例，四肢3例，躯干1例。另选择20例整形患者为对照组，男12例，女8例，平均年龄（50.7±22.8）岁。所有入选对象均无结缔组织病、免疫系统疾病及其他系统严重疾病。术前未进行其他抗肿瘤治疗。三组患者一般资料比较差异无统计学意义，具有可比性。 　　1.2 检测方法 　　所有皮肤癌患者均经手术切除病变组织送检。取病变组织10%甲醛固定，脱水，石蜡包埋，切片，厚度4 μm，各切5张，1张行HE染色，余4张行免疫组化染色。切片60℃烘焙2 h，脱蜡，就行梯度水化。蒸馏水冲洗2次，加3%H2O2溶液孵育10 min；蒸馏水冲洗，PBS缓冲液冲洗。血清封闭，分别加一抗，温育1h后，取出，4℃过夜。PBS缓冲液冲洗，每次5 min，共3次。加二抗，37℃，放置30 min。PBS液冲洗，每次5 min，共3次；加三抗，37℃、30 min，PBS液冲洗，每次5 min，共3次。加显色液，控制显色时间，然后自来水洗涤3次，终止显色。蒸馏水冲洗，苏木素复染，盐酸分化，蒸馏水再次冲洗。酒精梯度脱水，二甲苯透明，封片。 　　1.3 结果判定方法[2] 　　细胞浆或细胞膜染成棕黄色为阳性细胞。观察10个高倍镜。阴性：无瘤细胞；阳性瘤细胞2/3，着色深为（+++）。表达强度采用自动分析系统测量肿瘤细胞阳性成分的平均吸光度。根据免疫组化的检测结果，统计MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1阳性率与染色强度和表达强度，比较三组之间的差异。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS12.0统计学软件进行数据处理，三组间计数资料采用行×列卡方检验，计量资料采用均数±标准差表示，多组间的比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 MMP-2的表达 　　MMP-2主要表达于细胞浆，在非黑色素皮肤癌中的表达呈片状、弥散分布；在非黑色素皮肤癌中的表达高于正常皮肤表达。见封三图4、5和表1。 　　2.2 MMP-9的表达 　　MMP-9在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著高于正常皮肤。见表2、封三图6、7。 　　2.3 TIMP-2的表达 　　TIMP-2在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著低于正常皮肤。见表3和封三图8、9。 　　2.4 TIMP-1的表达 　　TIMP-1在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色