复方蚂蚁酒对大鼠佐剂性关节炎的防治作用及其机制.docVIP

复方蚂蚁酒对大鼠佐剂性关节炎的防治作用及其机制 　　[摘要] 目的 探讨复方蚂蚁酒对大鼠佐剂性关节炎的防治作用及其机制。 方法 选用60只SD大鼠，将其随机分为正常对照组、模型对照组、雷公藤多苷组和复方蚂蚁酒低、高剂量组（剂量分别为2.4、4.8 g/kg），每组各10只。各组给药3 d后，除正常对照组外，均采用弗氏完全佐剂足跖皮内注射复制佐剂性关节炎模型。于造模后第12天开始给药治疗，连续12 d。观察不同时间段的大鼠足趾肿胀率，检测大鼠血清一氧化氮（NO）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。 结果 与模型对照组和白酒对照组比较，雷公藤多苷组和复方蚂蚁酒低、高剂量组大鼠原发性和继发性足趾肿胀明显减轻，大鼠血清NO、IL-1β和TNF-α含量明显降低（P 0.05或P 0.01）。 结论 复方蚂蚁酒能减轻佐剂性关节炎大鼠的原发性和继发性足趾肿胀，其机制可能与其降低大鼠血清NO、IL-1β和TNF-α含量有关。 　　[关键词] 复方蚂蚁酒；佐剂性关节炎；一氧化氮；白细胞介素-1β；肿瘤坏死因子-α 　　[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）04（a）-0012-03 　　类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis）是一种慢性全身性自身免疫性疾病，病理基础为关节滑膜炎，可导致关节功能障碍，致残率较高。复方蚂蚁酒由蚂蚁、淫羊藿、乌梢蛇、木瓜等中药组成，具有祛风除湿、舒筋活络等功效，临床用于治疗风湿及类风湿性关节炎等。笔者前期的研究表明，复方蚂蚁酒有明显的抗炎镇痛、免疫调节和增强性功能等作用[1-3]。为进一步探讨其治疗类风湿性关节炎的作用机制，本文观察了复方蚂蚁酒对大鼠佐剂性关节炎的防治作用及其可能的作用机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 　　清洁级SD大鼠，体质量（200±20）g，♂，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供（动物生产许可证号：医动字第19-025号）。 　　1.2 试药 　　复方蚂蚁酒，处方由蚂蚁、淫羊藿、枸杞子、乌梢蛇、木瓜、薏苡仁、大枣等中药组成。制备方法：将淫羊藿、乌梢蛇、木瓜、薏苡仁、茯苓和丁香粉碎成粗粒，置陶制容器中，加入蚂蚁、枸杞子、桑葚和大枣，加白酒（52% Vol），在不断搅拌下密封浸泡30 d。过滤，药渣压榨后过滤。加入溶解后的冰糖，用蒸馏水调酒精度至38%Vol，密封静置30 d。过滤，分装，即得。每毫升相当于原生药0.48 g，临用时用白酒配制成50%浓度的稀释液。白酒（38%Vol、52%Vol，湖北稻花香酒业股份有限公司生产）。雷公藤多苷片（湖北黄石飞云制药有限公司生产，批号091201），临用时用注射用水配制成0.5 g/L浓度的混悬液。弗氏完全佐剂（Sigma公司产品），一氧化氮（NO）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）试剂盒由北京华英生物技术研究所提供。 　　1.3 仪器 　　YLS-7A足趾容积测量仪（山东省医学科学院设备站产品），SN-682型放射免疫γ计数器（上海核福光电仪器有限公司生产），DL-8R冷冻离心机（上海离心机械研究所生产），日立7060型全自动生化分析仪。 　　1.4 方法 　　1.4.1 动物分组及给药 取健康SD大鼠60只，随机分为6组，每组10只，即正常对照组、模型对照组、白酒对照组、雷公藤多苷组和复方蚂蚁酒低、高剂量组。各组大鼠均按10 mL/kg体重的剂量灌胃，每天1次，连续3 d。其中正常对照组和模型对照组灌服生理盐水，白酒对照组灌服38% Vol白酒，雷公藤多苷组灌服雷公藤多苷混悬液，复方蚂蚁酒低、高剂量组分别灌服50%复方蚂蚁酒稀释液和复方蚂蚁酒。 　　1.4.2 模型制作 于末次给药后30 min，除正常对照组外，将其余各组大鼠在乙醚浅麻醉下，于每鼠右后足趾皮内注射弗氏完全佐剂0.05 mL致炎[4]。于致炎后第12天开始，各组大鼠再次按上法给药，每天1次，连续12 d。 　　1.4.3 检测指标及方法 各造模组于致炎前和致炎后第8、16、24小时及第16、20、24天用足趾容积测量仪分别测量大鼠左右后足标记线以下的容积，按文献[5]方法计算各组的肿胀率。并观察大鼠前肢、耳和尾部病变的发生情况和体重变化。各组动物于末次给药后禁食24 h，在麻醉下经腹主静脉采血，3500 r/min离心10 min，分离血清于-70℃下保存。按试剂盒说明书操作，用硝酸还原酶法测定血清NO含量，采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNF-α的含量。 　　1.5 统计学方法 　　3 讨论 　　大鼠佐剂性关节炎是一种以关节滑膜组织破坏为特征的免