补气活血胶囊中阿魏酸的含量测定.docVIP

补气活血胶囊中阿魏酸的含量测定 　　【摘 要】本研究建立了高效液相色谱法测定补气活血胶囊中阿魏酸的含量，以控制补气活血胶囊的质量。样品经提取后，采用色谱柱为Phenomenex ODS3柱（250×4.6nm，5μm），流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83）；流速为1mL/min；检测波长为316nm下进行高效液相色谱法研究分析。本方法简单可行、稳定可控。 　　【关键词】补气活血胶囊；高效液相色谱；阿魏酸；含量测定 　　【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0754-02 　　补气活血胶囊处方由黄芪、当归、川芎等组成，为我院院内中药制剂，主要用于中风病的治疗，其汤剂经临床多年验证，安全、有效。为方便患者，将汤剂改为胶囊剂。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 XS105型电子天平（瑞士METTLER公司）； Agilent 1100 高效液相色谱仪；Agilent G1314A 紫外检测器；Agilent G1310A泵（美国安捷伦公司）；202型电热恒温干燥箱（上海跃进医疗器械厂）；ZB-1D智能崩解仪（天津大学精密仪器厂）； 　　1.2材料 阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110773-200611）；补气活血胶囊（蓬莱市中医院委托烟台大洋制药有限公司配制，批号分别为，批号分别20090509；乙醇为分析醇，甲醇为色谱纯，蒸馏水为新鲜自制。 　　2方法与结果 　　2.1.色谱条件 　　色谱柱为Phenomenex ODS3柱（250×4.6nm，5μm），流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83）；流速为1mL/min；检测波长为316nm；柱温室温；进样量20μl。 　　2.2对照品溶液的制备 　　取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12小时的阿魏酸对照品3mg，精密称定，置50mL棕色容量瓶中，加70%甲醇至近刻度，超声溶解，取出，放冷，补足溶剂至刻度，摇匀，即得每1mL含阿魏酸0.06mg的对照品溶液。 　　2.3供试品溶液的制备 　　取本品10粒的内容物，混合均匀，从中取出细粉约0.5g，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入70%乙醇20mL，精密称定总重，回流提取半小时，放冷，精密称重，补足溶剂至原重。滤过，取续滤液置棕色容量瓶中作为供试品溶液。 　　2.4空白干扰试验 　　按处方取除当归、川芎外的其他几味中药饮片，依处方制成样品，再按上述供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。进样20μl，结果如图1表明，阴性无干扰，此分析方法对阿魏酸测定具有专属性。 　　2.5.线性关系考察 　　精密量取对照品储备液0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0mL分别置10mL棕色容量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀。进样20μl，测得峰面积。以峰面积为纵坐标，以浓度（μg/mL）为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y=111.24X+15.035，r=0.9995。结果见图2、图3及表Ⅰ： 　　结果表明：阿魏酸对照品在1.565～37.560μg/mL的范围内与峰面积呈良好的线性关系。 　　2.6精密度试验 　　取浓度为6.260μg/mL的对照品溶液，重复进样6次，每次进样20μl，按上述条件测定峰面积，结果平均峰面积为732.8，RSD值为1.81%。结果见表Ⅱ： 　　平均峰面积为732.8，RSD值为1.81%，说明仪器的精密度良好。 　　2.7稳定性试验 　　取同一样品溶液（批，进行稳定性考察。在0、2、4、6、8、10h分别进样20μl，按上述条件测定峰面积，结果平均峰面积为684.7，RSD值为1.90%，说明样品溶液在10小时内稳定。样品高效液相图见图2，稳定性试验结果见图4及表Ⅲ： 　　2.8重复性试验 　　取浓度为12μg/mL的阿魏酸对照品溶液作为对照品溶液。 　　取同一批样品6份（批，按供试品溶液的制备方法制备得供试品溶液。分别进样20μl，按上述条件测定峰面积，计算阿魏酸含量，结果见表Ⅳ： 　　2.9加样回收率试验 　　取浓度为12μg/mL的阿魏酸对照品溶液作为对照品溶液。 　　精密称取已知含量的样品6份（批，每份0.25g，分别加入浓度为62.2μg/mL的阿魏酸对照品溶液1.0mL，再精密加入70%甲醇19mL，按供试品溶液的制备方法制备，得供试品溶液。 　　分别进样20μl，按上述条件测定峰面积，计算阿魏酸含量，结果见表Ⅴ： 　　2.10样品含量测定 　　取浓度为12μg/mL的阿魏酸对照品溶液作为对照品溶液。 　　取三批黄芪通脉活络胶囊样品，按供试品溶液的制备方法制备，