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IL—6基因多态性与冠心病发病机制研究 　　[摘要] 目的 本研究采用病例对照方法采用PCR分析IL-6 174G/C和 IL-6 572 G/C基因多态性与冠心病的相关性。 方法 共收集了103例冠心病病例，选取214例同期住院患者为对照病例，采用PCR分析IL-6 174G/C和 IL-6 572 G/C基因多态性，所有的分析均采用SPSS 11.0软件进行分析，以P 0.05为差异有统计学意义。 结果 男性、吸烟、高体重指数（BMI）， 糖尿病和高血压是冠心病的危险因素（P 0.05）。另外，低总胆固醇（TC）浓度，低高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）浓度、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度和高三酰甘油（TG）浓度是冠心病的危险因素（P 0.05）。IL-6 572 C/C基因型在病例组（11.7%）中的百分比显著性高于对照组（2.8%），差异有统计学意义（P 0.05）。而IL-6 572 C/C基因型与G/G基因型相比，C/C基因型能显著性的增加冠心病的风险，调整后的OR（95%CI）值为5.10（1.66～17.40）（P 0.05）。 结论 IL-6 174 G/C基因多态性与冠心病发病风险有显著性的相关关系，携带IL-6 174 C/C基因型的个体患冠心病的风险是携带G/G基因型的5倍多。 　　[关键词] IL-6；基因多态性；冠心病；发病风险 　　[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）06（a）-0028-03 　　冠状动脉粥样硬化是心脏病是冠状动脉粥样硬化导致血管腔栓塞，最后致心脏缺氧而引起的疾病，统称冠心病。动脉粥样硬化性疾病是发展中国家和发达国家主要死亡原因，我国冠心病发病和死亡率也呈现逐年上升的趋势[1]。而冠心病发病是多种因素造成的，包括了基因的和环境的因素，例如炎症、吸烟、高血压、糖尿病和基因易感性[2-3]。其中，炎性反应与细胞因子在动脉粥样硬化的发生和发展过程中起到了重要的作用，炎性反应及某些炎症因子的活性也是该疾病发生的重要因素。而白介素系统、肿瘤坏死因子、C-反应蛋白等都是重要的炎症因子。而之前有研究表明IL-6与冠心病发病有相关关系，是导致高血压和冠心病的危险因素[3]。而其基因启动子区域的白细胞介素-6 174G/C（IL-6 174G/C）rs1800795和白细胞介素-6 572G/C（IL-6 572G/C） rs1800796位点存在多态性。因此，为了进一步探讨白细胞介素IL-6 174G/C和IL-6 572 G/C与冠状动脉粥样硬化的相关性，本研究采用病例对照方法采用PCR分析IL-6 174G/C和 IL-6 572G/C与冠心病的相关性。 　　1 对象与方法 　　1.1 研究对象 　　病例来源于2008年7月～2011年7月内蒙古医科大学附属医院心内科患者，共计103人。病例纳入标准为根据冠状动脉造影结果，以主要管腔狭窄的直径≥70%或左冠状动脉主干管腔狭窄直径≥50%为诊断标准。对照组共选取了214例同期住院患者，未发现任何斑块或狭窄的病例。所有纳入对象如有感染、肿瘤、肝肾疾病、心肌炎、糖尿病、自身免疫性疾病、心肌炎、严重创伤等疾病均排除。总共选取103名冠心病患者，其中男62例，女41例，年龄为50～79岁，平均（61.5±11.4）岁。本资料通过内蒙古医科大学附属医院伦理委员会通过，所有研究对象均知情同意，并签署知情同意书。 　　1.2 DNA提取 　　所有研究对象采取空腹静脉血5 mL，在2 h内，采用3000 r/min离心10 min，提取血清冷冻于-20℃备用。采用TIANamp blood DNA kit （Tiangen Biotech，Beijing，China）试剂盒提取DNA。IL-6 174G/C位点PCR扩增上游引物5′- GGAGTCACACACTCCACCT-3′、下游引物5′- CTGATTGGAAACCTTATTAAG-3′。IL-6 572 G/C位点PCR扩增上游引物5′-GAGACGCCTTGAAGTAACTG-3′、下游引物5′–GAGTTTCCTCTGACTCCATCGCA-3′。反应条件：94℃预变性2 min，94℃变性30 s、64℃退火30 s、72℃延伸1 min，重复35个循环；反应体系：DNA 2 μL、2×Taqmastermix 10 μL、sybgreen 0.8 μL、引物0.8 μL、去离子水6.4 μL。取2 μL扩增产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，检验所得产物的特异性。 　　取PCR扩增产物10 μL，以8 u限制性内切酶Mbi处理IL-6 174G/C位点的扩增产物，以6 u限制性内切酶Bsrb处理IL