6.毒理第六章要素.ppt

皮肤原发性眼刺激试验 目的：检测外源化学物对实验动物皮肤的刺激和腐蚀强度 对化学物是否引起机体皮肤刺激反应进行预测是化学物安全性评价或危害鉴定的重要组成部分。 传统常用方法是由John Draize(1944)建立的皮肤刺激性和腐蚀性实验(Draize实验)。 然而,Draize实验本身存在的许多问题,如实验评分主观性强,结果重复性差,因种属间差异而影响其结果应用。 皮肤刺激动物实验替代物研究进展 组织细胞体外培养技术和生物组织工程技术等现代生命科学技术以及计算机模拟统计分析技术的不断进步与完善,拓宽了替代方法的研究领域,加快了替代方法的验证和应用。 国内外科学家在发展科学可靠的皮肤刺激反应实验替代方法方面进行了大量探索。 　皮肤刺激动物实验替代方法 1、体外细胞培养 （1）皮肤角质形成细胞培养：HaCaT 细胞是由正常人腹部表皮衍生而来的一种角朊细胞系,在浸没培养时即具有同正常人角朊细胞相似的分化特性,而且培养、传代十分方便,几乎能无限性提供同一细胞,从而解决皮肤细胞的来源问题,同时也可提高模型的重现性,因而备受科学家的关注。 （2）皮肤成纤维细胞培养：成纤维细胞在皮肤刺激反应中亦起着重要的作用,能分泌炎症因子影响皮肤炎症反应。研究证明人成纤维细胞培养可用于预测人类皮肤刺激物,而且具有相当高的敏感性。 结果 急性毒性试验：急性硒中毒动物在服药5min后出现急性硒中毒症状，最初表现为呕吐、腹泻，然后呼吸困难，四肢痉挛，直至死亡。急性硼中毒动物在服药60min后出现急性中毒症状，表现为不好动、腹泻、口鼻出血，甚至惊厥死亡 举 例 结果 举 例 结果 联合作用评价结果 举 例 讨论 LD50：四硼酸钠对雌、雄性大鼠1470mg/kg。亚硒酸钠对雄性大鼠14.70mg/kg，对雌性大鼠6.81mg/kg。联合对大鼠的急性毒性，雄性大鼠为1727.10mg/kg，雌性大鼠1717.94mg/kg 举 例 讨论 我国工业毒物急性毒性分级标准评价：本实验四硼酸钠与亚硒酸钠混合毒物属于低毒类物质。该毒物的值可为亚慢性毒性实验提供染毒剂量水平的设计依据 举 例 毒理学资料的外推 种属差异及外推：致畸、致癌（自发、敏感、靶器官） 高剂量效应与低剂量效应的差异与外推（高剂量和低剂量的效应性质不一定相同，剂量-反应曲线不同） 对化学物的安全性评价需要充分利用国内外资料，根据毒理学实验和流调 毒理学实验基本原则 第三节 短期、亚慢性和 慢性毒性作用 蓄积毒性 一、基本概念 二、蓄积毒性试验方法及其评价 一、蓄积作用 化学毒物进入机体后，经过生物转化以代谢产物或化学物原型排出体外。 但是，当化学毒物反复多次给动物染毒，化学毒物进入机体的速度(或总量)超过代谢转化的速度和排泄的速度(或总量)时，化学毒物或其代谢产物就有可能在机体内逐渐增加并贮留，这种现象称为化学毒物的蓄积作用(accumulation)。 蓄积作用实际上有二个含义： 物质蓄积(material accumulation) 功能蓄积(functional accumulation) 蓄积毒性试验方法及其评价 化学毒物的蓄积作用是发生慢性中毒的物质基础，因此研究化学毒物在机体内的蓄积性是评价化学毒物能否引起潜在慢性毒性的依据之一，也是卫生标准制订过程选择安全系数的主要依据。 蓄积毒性试验是研究化学毒物基础毒性的重要内容之一，目的是通过试验求出蓄积系数K，了解化学毒物蓄积毒性的强弱，并为慢性毒性试验及其他有关毒性试验的剂量选择提供参考。 蓄积作用的检测  理化方法：判断受试物在体内的蓄积情况、储存库及半衰期 生物学方法：判断受试物是否具有蓄积作用 二、短期毒性、亚慢性和慢性毒性作用的基本概念 短期毒作用（重复剂量毒性作用、亚急性毒性作用）：连续接触外源化学物28天内所产生毒效应； 二、短期毒性、亚慢性和慢性毒性作用的基本概念 一 亚慢性毒性作用： 亚慢性毒性的概念 亚慢性毒性试验的目的 亚慢性毒性试验的设计 二 慢性毒性作用： 慢性毒性的概念 慢性毒性试验的目的 慢性毒性试验设计 一、亚慢性和慢性毒性试验的概念、目的 (一) 概念： 短期毒作用（重复剂量毒性作用、亚急性毒性作用）：连续接触外源化学物28天内所产生毒效应。 亚慢性毒性(subchronic toxicity)是指人或实验动物连续接触较长时间、较大剂量的外源化合物所引起的毒性效。 慢性毒性(chronic toxicity)是指人或实验动物长期(甚至终生)反复接触低剂量的化学毒物所产生的毒性效应。 （二）试验目的： 1.确定受试物亚慢性和慢性毒性的效应谱，对在急性及亚