流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床分析.docVIP

流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床分析 　　[摘要] 目的 分析流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床效果。 方法 对本院收治的急性杂合性白血病（HAL）患者、伴有淋系抗原表达型急性髓细胞白血病（Ly+AML）患者及伴有髓系抗原表达型急性淋巴细胞白血病（My+ALL）患者于治疗一、二疗程后分别行流式细胞术检测，对比检测结果。 结果 HAL患者在髓系CD33免疫表型的阳性率最高为95%，在B系CyCD22免疫表型的阳性率最高为75%，在T系CD7免疫表型的阳性率最高为30%，且在CD2、CyCD3、CD5中均有表达。第一、二疗程Ly+AML与My+ALL的诱导缓解率均明显高于HAL（P 0.05或P 0.01）。 结论 流式细胞术检测急性杂合性白血病具有较高的阳性检出率，对于临床治疗的效果评估具有重要的指导意义。 　　[关键词] 流式细胞术；急性杂合性白血病；免疫学检测；临床价值 　　[中图分类号] R37 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）06（a）-0114-02 　　白血病属于造血干细胞的克隆性病变，以白血病细胞发生异常增殖、成熟分化障碍且伴凋亡减低为主要特征[1]。随着白血病诊断方法的逐渐成熟，目前流式细胞术（FCM）已被作为白血病的一种首选临床检测方式[2]。本院于治疗前后分别对急性杂合性白血病（HAL）、伴有淋系抗原表达型急性髓细胞白血病（Ly+AML）及伴有髓系抗原表达型急性淋巴细胞白血病（My+ALL）患者进行了FCM检测，现将检测情况报道如下： 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　本次入选资料为本院2006年1月～2012年6月收治的72例免疫表型为二系以上的急性白血病患者。其中，男44例，女28例；年龄18～36岁，平均（25.31±6.29）岁；包括HAL 20例、Ly+AML 29例、My+ ALL 23例。全部患者均行骨髓涂片常规染色检查，过氧化物酶及糖原染色等相关细胞学染色检查；血液涂片均以常规瑞氏染色，读取100个细胞。 　　1.2 方法 　　1.2.1 标本提取 全部患者均于化疗前于本院采集骨髓液2～2.5 mL，EDTA抗凝，标本冷藏2～5℃环境下快速送到武汉康圣环球医学特检有限公司进行检测。 　　1.2.2 检测方法 使用流式细胞仪进行检测，型号XL2。单体克隆抗体，髓细胞系包括CD13、HLA-DR，B淋巴细胞系包括CD10、CD19、CD20、CyCD22、CD79a，T淋巴细胞系包括CD2、CD5、CD7、CyCD3。采取单克隆抗体三色荧光标记法，于每管样本内加入50 μL肝素抗凝，而后加入20 μL荧光抗体，充分混匀后置于室内背光处于室温下放置30 min，常规溶血处理后以PBS洗涤，以甲醛PBS稳定后上流式细胞仪检测，仪器每次记数104个以上细胞。 　　1.2.3 诊断标准 抗原表达 20%为阳性诊断标准[3]。诊断标准以欧洲AL免疫分型协作组（EGIL）所制订的积分标准执行[4]。 　　1.2.4 治疗方法 HAL患者给予淋系与髓系白血病联合化疗TA方案治疗：治疗第1～3天给予THP静滴20 mg/m2，第1～5天给予阿糖胞苷（Ara-C）静滴100 mg/m2[5]；Ly+AML给予标准TA方案治疗，My+ALL给予VDLP方案进行治疗：第1、8、15、22天长春新碱1.4 mg/（m2·d），第1、8、15、22天给予柔红霉素（DNR）40 mg/（m2·d），第22～28天给予左旋门冬酰胺酶6000 U/（m2·d），第1～28天给予泼尼松60 mg/（m2·d）[6]。 　　1.2.5 观察方法 统计各系抗原表达阳性率；于治疗第一、二疗程后分别统计诱导缓解率并进行对比，Ly+AML、My+ALL分别与HAL进行对比。 　　1.3 统计学方法 　　使用SPSS 18.0软件进行数据检测，计数资料采用χ2检验，以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 化疗前抗原表达 　　HAL患者在髓系CD33免疫表型的阳性率最高为95.00%（19例），Ly+AML患者为72.41%（21例），My+ALL患者为47.83%（11例）；HAL患者在B系CyCD22免疫表型的阳性率最高为75.00%（15例），Ly+AML患者为24.14%（7例），My+ALL患者为60.87%（14例）；HAL患者在T系CD7免疫表型的阳性率最高为30.00%（6例），且在CD2、CyCD3、CD5中均有表达，Ly+AML患者CD7免疫表型的阳性率为72.41%（21例），但其余均无表达，My+ALL患者未见阳性。 　　2.2 缓解情况 　　Ly+AML、My+ALL分别与HAL进行比较，第一