白血病干细胞相关基因在急性白血病中的表达及临床意义.docVIP

白血病干细胞相关基因在急性白血病中的表达及临床意义 　　[摘要] 目的 探讨白血病干细胞相关基因在急性白血病中的表达及临床意义，为临床白血病的诊治研究提供参照。 方法 随机选取2008年1月～2012年12月本院收治的急性白血病（观察组）以及血液良性病（对照组）患者各50例，分别检测患者骨髓细胞HOX、Bmi-1与PTEN基因的表达水平并进行比较分析；同时，对观察组治疗后达到缓解患者（观察组A）与难治复发患者（观察组B）骨髓细胞HOX、Bmi-1与PTEN基因的表达水平进行检测并进行分析比较。 结果 观察组患者HOX、Bmi-1与PTEN基因均呈现出较高表达水平，对照组患者HOX、Bmi-1与PTEN均未见相应的表达；观察组A患者HOX、Bmi-1与PTEN表达水平较观察组B患者低，以上基因表达水平比较，差异均有统计学意义（P0.05）。 结论 白血病干细胞相关基因（HOX、Bmi-1与PTEN）在急性白血病患者骨髓细胞中存在较高表达，对患者疗效观察及预后判断具有重要意义。 　　[关键词] 白血病干细胞；急性白血病；PTEN；Bmi-1；HOX 　　[中图分类号] R733.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（c）-0055-02 　　急性白血病是一类造血干（祖）细胞来源的恶性克隆性血液系统疾病。近年来医学研究证实，在白血病干细胞（leukemia stem cells，LSC）表面HOX、Bmi-1以及PTEN等基因高表达[1]。对LSC相关基因进行研究，对急性白血病的诊断与治疗具有重要的临床意义。临床研究显示，急性白血病治疗后复发与HOX等基因表达有重要的相关性[2]。本文回顾性分析本院收治的急性白血病患者的临床资料，对LSC相关基因进行研究分析，为急性白血病的诊断治疗及预后判定提供参考。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　随机选取2008年1月～2012年12月于本院接受治疗的急性白血病患者50例为观察组，其中，男23例，女27例；年龄12～74岁，平均（42.8±3.6）岁。参照WHO相关的分型标准对观察组50例患者进行临床分型[3]，T-ALL型患者4例，B-ALL型患者8例，M0、M2、M3、M4、M5型患者分别有4、11、8、5、10例。随机选取同期本院收治的良性血液病患者50例为对照组，其中，男22例，女28例；年龄14～75岁，平均（43.2±3.7）岁。两组在年龄、性别等一般资料方面，差异无统计学意义（P0.05），有可比性。 　　1.2检测方法 　　1.2.1 仪器与试剂 PCR仪器以及试剂均由Fermentas提供，淋巴细胞分离试剂由川页生化公司（天津）提供，引物由上海生工生物有限公司提供。 　　1.2.2 引物合成方法 依照NCBI查找HOX、Bmi-1以及PTEN基因的全序列号，并使用引物设计软件分别设计合成相应的引物[4]。 　　1.2.3 骨髓核细胞分离与RNA提取 分别采集患者4 ml骨髓，并采用梯度离心法分离出核细胞，RNA提取采用TRIzoL法[5]。 　　1.2.4 基因表达水平的检测 采用RT-PCR检测法分别对所有患者LSC相关基因HOX、Bmi-1以及PTEN的水平进行检测，严格按照PCR仪的操作说明进行[6]。 　　1.3评价指标 　　①对两组患者骨髓细胞HOX、Bmi-1及PTEN基因的表达水平进行比较分析。②观察组50例患者给予化疗治疗，并根据治疗结果分为观察组A与观察组B。经诱导缓解化疗1个疗程后达到完全缓解，经化疗或造血干细胞移植治疗后生存期大于1年的20例患者为观察组A（M2 4例，M3 7例，M4 2例，M5 3例，B-ALL 4例）。化疗后未达到缓解，或治疗后早期复发的30例患者为观察组B。对两组患者的HOX、Bmi-1及PTEN基因水平分别进行检测，并对结果进行比较分析。 　　1.5统计学方法 　　采用SPSS 16.0统计学软件分析数据，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，并采用t检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 两组患者HOX、Bmi-1与PTEN表达水平的比较 　　观察组患者HOX、Bmi-1与PTEN基因均呈现出明显的高水平表达，对照组患者HOX、Bmi-1与PTEN表达水平较低，两组比较，差异有统计学意义（P0.01）（表1）。 　　2.2 观察组不同治疗结果患者HOX、Bmi-1与PTEN表达水平的比较 　　观察组50例患者中，观察组A患者HOX、Bmi-1与PTEN表达水平较观察组B患者低，差异有统计学意义（P0.05）（表2）。 　　2.3 观察组A患者治疗前与诱导缓解后HOX、Bmi-1与PTEN表达水平的比较