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高三生物动物细胞工程人教版
【同步教育信息】
一. 本周教学内容:
动物细胞工程
二. 学习重点:动物细胞培养、单克隆抗体
三. 学习过程:
动物细胞工程
动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。其中,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
(一)动物细胞培养
许多动物细胞能够分泌蛋白质,如抗体等。但是单个细胞分泌的蛋白质的量是很少的,怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?这就要借助于大规模的动物细胞培养了。
1. 动物细胞培养过程:
单个细胞细胞株细胞系
原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40~50代,这种传代细胞叫做细胞株。细胞株细胞的遗传物质没有发生改变。当细胞株传至50代以后又会出现“危机”,不能再传下去。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变,并且带有癌变的特点,有可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称为细胞系。
2. 条件:
(1)培养液:通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
(2)严格的无菌条件。
(3)定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来,配制成细胞悬浮液,再进行培养。
3. 应用:
(1)许多有重要价值的蛋白质生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。
(2)用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养,可以获得大量自身的皮肤细胞,为大面积烧伤的病人移植。
(3)培养的动物细胞还可以用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后,培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数,可以判断某种物质的毒性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的快速而灵敏的有效手段。医学家培养各种正常的或病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据。
(二)动物细胞融合
动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的,诱导融合的方法也相类似,动物细胞的融合还常常用到灭活的病毒作为诱导剂。很多不同种类的动物细胞之间或动物与人的细胞之间都能进行融合,形成杂种细胞,例如人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴等的细胞都能进行融合。动物细胞融合技术最重要的用途,是制备单克隆抗体。
(三)单克隆抗体
长期以来,人们为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。为了解决这一难题,科学家们进行了多年的研究和探索。科学家们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此,要想获得大量的单一抗体,必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆,形成细胞群,这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。遗憾的是,在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。那么怎样才能获得单克隆抗体呢?
1. 单克隆抗体的制备 :首先将抗原注射入小鼠体内,然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合,再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质,因此,它不仅具有B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力,还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。他们培养杂交瘤细胞,从中挑选出能够产生所需抗体的细胞群,继续培养,以获得足够数量的细胞,在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。这样,从细胞培养液或小鼠的腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体。
2. 单克隆抗体的应用 :
单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性非常明显。国内外已有多种单克隆抗体实现商品化,制成单抗诊断盒,有的已投放市场。人们正在研究用单克隆抗体治疗癌症,就是在单抗上连接抗癌药物,制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞,又不会伤害健康细胞。
(四)哺乳动物的胚胎移植
1. 过程:
体外受精→体内发育
2. 特点及应用:
属于有性生殖范畴,具备双亲的性状;用于试管婴儿、试管牛等的培育。
以优良种牛的繁殖为例,科学家们首先用激素促进良种母牛多排卵,然后把卵细胞从母牛体内取出,在试管内与人工采集的精子进行体外受精,培育成胚胎,再把胚胎送入经过激素处理、可以接受胚胎植入的母牛子宫内,孕育成小牛产出。用这种方法得到的小牛叫做试管牛。利用胚胎移植技术可以使每头良种母牛一年繁殖牛犊上百头。许多国
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