高中生物基因工程的基本工具和操作程序教案.docVIP

基因工程的基本工具和操作程序 考纲等级要求 A级 考点要求 分析基因工程研究的理论基础 说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用 简述基因工程基本操作程序的四个步骤 简述目的基因的获取、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及原理 三、复习过程 基因工程的基本工具和操作程序 一、基因工程的四步骤： 、 、 、 目的基因的获取 说出获取目的基因的方法 （1）基因文库 例1：下列属于基因文库的有： A、基因库 B、基因组文库 C、部分基因库 D、部分基因文库 （2）PCR技术 概念：PCR全称为_______________，是一项____复制___________的核酸合成技术 __________ ③条件：_______________________、_______________、___________ (做启动子)、 ________________方式扩增，即____（n为扩增循 ⑤结果：使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 ⑥过程： a、DNA变性90℃-96℃）：双链DNA模板_____断裂，形成___________ b、退火25℃-65℃）：系统温度降低，引DNA模板结合，形成局部________。 c、延伸70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从5′端→3′端______ 例2：在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，最主要的特点是： A、专一性 B、高效性 C、热稳定性 D、受PH值影响 （3）获取目的基因的工具——限制性核酸内切酶 来源：主要是从 功能：能够识别双链DNA分子的某种 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。大多数限制酶的识别序列由 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 。前者是限制酶在它识别序列的 将DNA的两条链切开产生的，后者是限制酶在它识别序列的 ①TCG ②AATTCGA ③CA ④AGCTTC ⑤AATTCGA AGCTTAA GCT GTTCCA AG AGCT A、①② B、①③ C、①④ D、②③ E、①⑤ 基因表达载体的构建——核心 （1）工具 ①载体 载体具备的条件：转基因工程的运载体必须具备的条件是 A．能在宿主细胞中复制并保存 B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 C．具有标记基因，便于进行筛选 D．是环状形态的DNA分子下列哪些可作为基因工程技术中常用的“分子运输车” A．大肠杆菌 B．质粒 C．动物病毒 D．线粒体②限制性核酸内切酶 ③DNA连接酶 DNA连接酶的种类 连接末端 作用 例6：在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） A.同种限制酶 B. 两种限制酶 C.同种连接酶 D. 两种连接酶 （2）基因表达载体的组成 例7：下列是基因表达载体组成必须的有 A、目的基因 B、启动子 C、终止子 D、标记基因 E、抗生素基因 例8：由于质粒与目的基因具有的黏性末端，结合过程中可能出现下列哪种情况 A、形成环状的外援DNA B、可能形成环状的运载体DNA C、可能形成重组DNA D、只出现重组DNA 将目的基因导入受体细胞 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 受体细胞 转化过程 目的基因的检测与鉴定 检测 是否导入 检测是否转录 检测是否翻译 鉴定是否正确 例9：目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能