增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体中血管生成素-2表达.docx

中国医科大学硕士学位论文增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体中血管生成素-2的表达姓名：谷峰申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：刘哲国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．论文作者签名：：金蜂ｌ日期：堑２ｉ！：２中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：垒！奎日期：≥翌乙￡！’。７指导教师签名：么蚴?中文论著摘要?增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体中血管生成素．２的表达目的通过检测ＰＤＲ患者玻璃体中Ａｎｇ一２的表达情况，以及ＰＤＲ患者玻璃体液对人脐静脉血管内皮细胞（ｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ，ｍⅣＥＣｓ）生长情况的影响，探讨Ａｎｇ－２在ＰＤＲ发病过程中的作用，以进一步研究ＰＤＲ的发病机制，为抗新生血管形成的治疗提供理论基础。材料与方法一、材料来源１、ＰＤＲ患者玻璃体液取自２００５年１２月至２００６年９月在中国医科大学附属一院眼科行玻璃体切割手术的ＰＤＲ患者，２５例２６只眼。正常人玻璃体液取自角膜移植供体眼，５例５只眼。２、人脐静脉血管内皮细胞株（ｍⅣＥｃｓ）购自中国医科大学肿瘤研究所。３、主要试剂：人Ａｎｇ一２定量ＥＩＡ试剂盒（购自上海西唐生物科技有限公司）；单克隆兔抗人Ａｎｇ－２一抗，免疫组化ＳＡＢＣ试剂盒和ＤＡＢ显色试剂盒（购自武汉博士德生物制品有限公司）。二、实验方法１、采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定２５例ＰＤＲ患者２６只眼及５例正常人５只眼玻璃体中Ａｎｇ－２的含量。２、制备培养的ＨＩⅣＥＣｓ爬片，选取生长状态好的细胞爬片，随机分成３组：Ａ组为空白对照组，Ｂ组为试验对照组给予正常人玻璃体液，ｃ组为试验组给予ＰＤＲ患者玻璃体液，培养２４小时后，观察细胞形态学改变，固定行Ａｎｇ．２免疫细胞化学染色。３、统计学分析采用ＳＰＳＳｌ３．０ＦｏｒＷｉｎｄｏｗｓ统计软件对测定结果行Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ秩和检验及Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析，Ｐ＜Ｏ．０５有统计学意义。结果１、ＰＤＲＶ期（５４０．５４７０ ｐｇ／ｍ１）和ＶＩ期（４７２．２０６０ ｐｇ／ｍ１）患者玻璃体中Ａｎｇ－２含量明显高于正常对照组（７．９１７０ ｐｇ／ｍ１），差异有显著的统计学意义（Ｐ《０．０１），ＰＤＲＶ期患者的玻璃体中Ａｎｇ－２含量高于Ⅵ期患者，但差异无统计学意义（Ｐ＞ｏ．０５）。２、ＰＤＲ患者玻璃体中Ａｎｇ－２含量与视力下降加重病史呈负相关，，＝－－０．８０２，Ｐ＜Ｏ．０１。３、ＰＤＲ患者玻璃体ｄｅＡｎｇ－２含量与开始出现视物模糊、眼前黑影飘动病史无相关性（ｐ＇ｏ．０５）。４、ＰＤＲ患者玻璃体中Ａｎｇ－２含量与糖尿病病史无相关性ＣＰ＞Ｏ．０５）。５、ＰＤＲ患者玻璃体液处理的ＨＵＶＥＣｓ呈十字交叉样或不规则分布，可见不规则管腔样结构，细胞呈梭形，ＡＩｌｇ－２免疫细胞化学染色呈强阳性表达；而试验对照组细胞均匀分布，可见较规则的管腔样结构，Ａｎｇ．２免疫细胞化学染色呈弱阳性表达。结论Ａｎｇ－２在ＰＤＲ患者玻璃体中的含量明显高于正常人，Ａｎｇ－２可能参与了ＰＤＲ的发病过程，可能是在视网膜新生血管形成的始动因子之一。关键词增殖性糖尿病视网膜病变；血管生成素．２；脐静脉血管内皮细胞；酶联免疫吸附法：免疫细胞化学染色２?英文论著摘要?Ｖｉｔｒｅｏｕｓ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ一２ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｄｉａｂｅｔｉｃ ＲｅｔｉｎｏｐａｔｈｙＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ－２（Ａｎｇ－２）ｉｎ ｔｈｅｖｉｔｒｅｏｕｓ ｆｌｕｉｄｓ ｏｆｐａｉｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ（ＰＤＲ）ａｎｄｔｏａｓｃｅ．ａｍｔｈｅｉｒｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ，ｉｆ ａｎｙ，ｉｎ ａｎｇｉ