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两步法扩增诱导脐血及动员外周血CD34+细胞来源树突状细胞的比较 nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp; 作者：王亚非 孟恒星 葛薇 于珍 李云涛 李桥川 万长春 nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp; 徐燕 李新 李增军 王国蓉 尤胜国 邱录贵nbsp; 【摘要】nbsp; 　　为了比较先扩增、后诱导的两步法从脐血（CB）CD34＋细胞和动员外周血（MPB）CD34＋细胞诱导所得DC的产量及功能，将免疫磁珠分选获得的CB-CD34+细胞和MPB-CD34＋细胞用FL、TPO、SCF、GM-CSF等细胞因子先扩增10天，然后加入GM-CSF、IL-4及TNF-α、CD40Ab、PGE2等细胞因子组合诱导获得DC。采用流式细胞仪检测DC表型，混合淋巴细胞培养检测DC刺激异基因T细胞增殖能力，ELISA法检测DC分泌IL-12能力，Transwell板检测DC在次级淋巴组织趋化因子（SLC）介导下的趋化功能。结果表明： ① 扩增10天时CB组、MPB组细胞中CD14+CD1a-细胞含量无显著差异［（40.48±16.85）% vs （28.07±23.19）%， Pgt;0.05］。但由于CB组细胞扩增倍数显著高于MPB组（388.88±84.63倍vs 79.67±10.32倍， Plt;0.01），CB组CD14+CD1a-细胞扩增倍数显著高于MPB组（189.42±25.02倍vs 28.74±23.27倍， Plt;0.01）； ②TNF-α/CD40Ab/PGE2条件下与TNF-α条件下相比，CB组和MPB组所得DC均表达更高的CD83［分别为（34.52±11.22）% vs （3.70±2.27）%、（36.69±13.36）% vs （7.34±3.364）%， P均lt;0.01］； ③CB组与MPB组在TNF-α/CD40Ab/PGE2诱导条件下所得DC均高水平表达CD83、CD86、HLA-DR、CD11c、CD54、CD40，CB组所得CD83+细胞的扩增倍数显著高于MPB组（198.72±117.53倍vs 33.95±6.19倍，Plt;0.01）； ④CD40Ab/PGE2/TNF-α条件下CB与MPB来源的DC在刺激异基因T细胞增殖、IL-12的分泌［（16.2±4.31）pg/ml vs （13.5±4.1）pg/ml］以及SLC介导的迁移率［（28.09±7.76）% vs （18.5±3.47）%］上均无显著差别（P均gt;0.05）。结论： 在两步法培养体系下，CB-CD34+细胞与MPB-CD34+细胞来源的DC具有相同的功能，而前者产量显著高于后者。 【关键词】nbsp; 树突状细胞 脐血 动员外周血 CD34＋细胞 两步法培养法 　　　Comparison of Expanding Dendritic Cells Derived from Cord Blood and Mobilized Peripheral Bloodnbsp; by Two-step Culture Method 　　　AbstractTo compare the expansion efficiency and function of dendritic cells derived from CB-CD34+ cells and MPB-CD34+ cells by usingnbsp; two-step culture method， enriched CB-CD34+ cells or MPB-CD34+ cells with immunoadsorption were primarily cultured in the presence of FL, SCF, TPO， GM-CSF for 10 days, and then further cultured with a combination of GM-CSF,IL-4,TNF-α,CD40Ab and PGE2 to induce DC. The DC phenotypes were detected by flow cytometry, the expansion efficiency and cell function were evaluated bynbsp; mix-lymphocyte reaction(MLR), IL-12