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细胞工程基础
(一)细胞周期调控系统的组成 1.细胞周期调控系统的蛋白质组成元件 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶Cdk(Cyclin-dependent kinase,Cdk) 是细胞周期调控系统的核心成分,由一组蛋白激酶组成 Cdk家族成员:Cdk1(Cdc2)、Cdk2 、Cdk3、Cdk4、Cdk5、Cdk6、Cdk7、Cdk8、Cdk9 特点: 1、都存在1个Cdk激酶结构域,其保守序列可与细胞周期蛋白结合 2、存在可磷酸化的氨基酸残基(与Cdk活性相关) 3、Cdk活性的周期性 4、活性靠一系列酶和蛋白质的复合体控制(最重要的是细胞周期蛋白) 细胞周期蛋白Cyclin Cyclin家族成员: 真核生物(A、B、C、D、E、F、G、H、T 等) 酵母(Cln1、 Cln2、 Cln3、 Cl b1、 Cl b2、 Cl b3、 Cl b4、 Cl b5、 Cl b6等) 周期蛋白框(与Cdk结合) Cyclin分类 G1/S- Cyclin S- Cyclin M- Cyclin G1- Cyclin Cyclin-Cdk复合物的多样性的意义 (1)Cyclin-Cdk---调控细胞周期的引擎:不同的周期蛋白与不同的CDK结合,构成不同的Cyclin-Cdk; (2)不同的Cyclin-Cdk在不同的时相表现活性,影响不同的下游事件。 2、细胞周期检查点(checkpoint) 细胞周期检查点是细胞周期调控的一种机制, 主要是确保周期每一时相事件的有序、全部完 成并与外界环境因素相联系 细胞周期调控系统的主要作用 在适当时候不同的细胞周期蛋白-Cdk复合物磷酸化不同的靶蛋白,从而诱导特定的细胞周期时间的发生. 确保每一时相事件的全部完成 对外界环境因子起反应 动物克隆 不经过有性生殖过程,而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术,就叫做动物克隆。 1.细胞分化潜能逐渐变窄 全能细胞(totipotent cell):单个细胞在一定条件下分化 发育成为完整个体的潜能称为细胞的全能性。 多能细胞(pluripotent cell):虽然局限,但仍有发育成 多种表型细胞的能力,这种细胞称为多能细胞。 单能细胞(unipotent cell):形态上、功能上专一化的终 末分化细胞,被称为单能细胞。 动物细胞分化潜能 受精卵 卵细胞 卵裂至8个细胞前的细胞。 大量实验证实:各种分化细胞的核含有物种的完整基因组,在一定条件下,仍具有全能性。 克隆羊多莉 1996.7------2003.2 体细胞的分化潜能实验 细胞发育的全能性___为细胞工程中细胞与组织培养、 克隆等技术的发展奠定了理论基础 ?????????????????? The Cloning of Dolly The cloning of Dolly has proved that cloning of adult animals could be accomplished. Previously, it was not known if an adult nucleus was still able to produce a completely new animal. Genetic damage or the simple deactivation of genes in cells were both considered possibly irreversible. This however was not the case. Ian Wilmut and Keith Cambell discovered a method with which to synchronize the cell cycles of the donor cell nucleus and the host egg cell cytoplasm. Without synchronized cell cycles, the donor nucleus would not be in the correct state for the host egg to accept it. The donor cell was forced into the Go stage of the mitotic cell cycle by starving the cells. When the nucleus enters the egg cytoplasm, egg proteins re-program the chromosomes i
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